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猪链球菌2型分泌性核酸酶A(SsnA)活性检测及其基因序列的克隆与测序分析
引用本文:张东,王楷宬,汤明,黄保续,范伟兴.猪链球菌2型分泌性核酸酶A(SsnA)活性检测及其基因序列的克隆与测序分析[J].中国兽医学报,2007,27(6):922-926.
作者姓名:张东  王楷宬  汤明  黄保续  范伟兴
作者单位:1. 西南大学,动物科技学院,重庆,4007152
2. 中国动物卫生与流行病学中心,山东,青岛,266032
3. 重庆市动物卫生监督总站,重庆,401147
基金项目:引进国际先进农业科技计划(948计划)
摘    要:对8株猪链球菌2型重庆分离株的核酸酶A全基因进行克隆测序,结果表明该基因长度为3 126 bp,与Gen-Bank发表的唯一的该基因的序列相比,核苷酸同源性高于98%,推导的氨基酸同源性高于94%。根据核酸酶A基因的测序结果建立扩增片段长度为301 bp的PCR检测方法,并用甲苯胺蓝DNA酶琼脂对猪链球菌分泌性核酸酶A的活性进行检测。检测了从病猪内脏分离的猪链球菌致病株35株,33株核酸酶A基因PCR检测阳性(阳性比例为94.3%),其中有24株分泌活性检测为阳性(阳性比例68.6%);正常猪扁桃体分离株14株,PCR检测为阳性的10株(阳性比例71.4%),其中有核酸酶A分泌活性为8株(阳性比例57.1%),检测菌株中有2型猪链球菌44株,38株扩增出核酸酶A基因的片段PCR检测阳性并且分泌活性为阳性的有32株,猪链球菌1型、7型、9型、13型、1/2型各1株,均能扩增出核酸酶A基因的片段,但只有13型猪链球菌有核酸酶A分泌活性。对猪链球菌在不同生长时期核酸酶活性的检测显示,猪链球菌在培养4、8、16、32、48 h均有核酸酶A的分泌,并且C a2 和M g2 为分泌性核酸酶A的活性必需因子。

关 键 词:猪链球菌  链球菌核酸酶A  核苷酸序列测定  活性检测
文章编号:1005-4545(2007)06-0922-05
修稿时间:2007-02-14

Activity detection and nucleotide sequencing of Streptococcus suis DnaseA (SsnA)
ZHANG Dong,WANG Kai-cheng,TANG Ming,HUANG Bao-xu,FAN Wei-xin.Activity detection and nucleotide sequencing of Streptococcus suis DnaseA (SsnA)[J].Chinese Journal of Veterinary Science,2007,27(6):922-926.
Authors:ZHANG Dong  WANG Kai-cheng  TANG Ming  HUANG Bao-xu  FAN Wei-xin
Institution:1. Animal Science College, Southwest University,Chongqing 400715,China ; 2. China Animal Health and Epidemiology Center ,Qingdao, Shandong 266032,China ; 3. Chongqing Animal Health Supervision General Station, Chongqing 401147,China
Abstract:
Keywords:Streptococcus suis serotype 2  Streptococcus suis Dnase A  nucleotide sequencing  activity detect
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