| 猪圆环病毒2型感染性DNA的构建及病毒拯救 |
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| 引用本文： | 杨顺利,尹双辉,沈小燕,尚佑军,刘湘涛.猪圆环病毒2型感染性DNA的构建及病毒拯救[J].中国兽医学报,2011,31(2). |
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| 作者姓名： | 杨顺利 尹双辉 沈小燕 尚佑军 刘湘涛 |
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| 作者单位： | 中国农业科学院兰州兽医研究所,家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室国家口蹄疫参考实验室,甘肃,兰州,730046 |
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| 基金项目： | 国家科技支撑计划(2006BAD06A012); 家畜疫病病原生物学国家重点实验室课题(SKLVEB2008ZZKT041) |
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| 摘 要： | 用PCR法扩增猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)全长基因组。将全基因组插入到真核生物表达载体PcDNA3.1的多克隆位点中,获得单拷贝重组质粒P-PCV2和串连双拷贝重组质粒p-2PCV2,将所得质粒分别转染无PCV污染的PK-15细胞系,经7次连续传代后,间接免疫荧光试验显示在细胞中含有病毒抗原。提取mRNA后经RT-PCR检测都有PCV2特异性基因转录。免疫小鼠后,对免疫后不同天数小鼠的血清用ELISA检测,结果到免疫后35 d病毒几乎都能检测到衣壳蛋白特异性抗体,小鼠致死后在其体内也能检测到病毒DNA。结果表明,所构建的2种重组质粒均可表达并在体外组装出有感染性PCV2病毒粒子。为进行PCV2分子特性、疫苗免疫及致病机理研究打下了基础。
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| 关 键 词： | 猪圆环病毒2型 感染性克隆 病毒拯救 |
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