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重组猪蛔虫抗菌肽cecropin P1在毕赤酵母中的表达及抑菌活性
引用本文:李巍,仲飞,李秀锦,张峰,刘龙飞,王淼,李凌,王幸兴,韩冬梅,潘素敏.重组猪蛔虫抗菌肽cecropin P1在毕赤酵母中的表达及抑菌活性[J].中国兽医学报,2011,31(8).
作者姓名:李巍  仲飞  李秀锦  张峰  刘龙飞  王淼  李凌  王幸兴  韩冬梅  潘素敏
作者单位:1. 河北农业大学动物科技学院,河北保定,071001
2. 燕山大学环境与化学工程学院生物工程系,河北秦皇岛,066004
3. 保定市畜牧水产局,河北保定,071051
基金项目:河北省科技支撑计划资助项目(0722401D); 河北农业大学校长基金资助项目(XZJJ2005-06)
摘    要:根据已发表的蛔虫抗菌肽cecropin P1基因编码序列设计引物,采用RT-PCR方法从猪肠道蛔虫中扩增出cecropin P1基因,并将其插入到酵母分泌型表达载体pPIC9K中α-因子信号肽下游的SnaBⅠ和NotⅠ位点之间,构建成cecropin P1基因的酵母分泌型表达载体pPIC9K/cecropin P1。载体经SalⅠ酶切线性化,电转化到组氨酸缺陷型的酵母宿主菌GS115中,然后利用以葡萄糖为碳源的培养基(MD)和以甲醇为碳源的培养基(MM)筛选出组氨酸His+型和甲醇利用正型(Mut+)酵母重组体,再经G418加压筛选得到高拷贝cecropin P1基因的重组酵母。经PCR检测证明cecropin P1基因已整合到毕赤酵母的染色体中。重组酵母经摇瓶发酵培养和甲醇诱导,通过Tricine-SDS-PAGE检测,重组酵母能够分泌表达重组cecropin P1,同时表达的cecropin P1对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌均有明显的抑菌活性。

关 键 词:猪蛔虫  抗菌肽  cecropin  P1  毕赤酵母  抑菌活性

Expression of Ascaris suum cecropin P1 gene in Pichia pastoris and its antimicrobial activity
LI Wei,ZHONG Fei,LI Xiu-jin,ZHANG Feng,LIU Long-fei,WANG Miao,LI Ling,WANG Xing-xing,HAN Dong-mei,PAN Su-min.Expression of Ascaris suum cecropin P1 gene in Pichia pastoris and its antimicrobial activity[J].Chinese Journal of Veterinary Science,2011,31(8).
Authors:LI Wei  ZHONG Fei  LI Xiu-jin  ZHANG Feng  LIU Long-fei  WANG Miao  LI Ling  WANG Xing-xing  HAN Dong-mei  PAN Su-min
Institution:LI Wei1,ZHONG Fei1,LI Xiu-jin2,ZHANG Feng1,LIU Long-fei1,WANG Miao3,LI Ling1,WANG Xing-xing1,HAN Dong-mei1,PAN Su-min1(1.College of Animal Science and Technology,Hebei Agricultural University,Baoding,Hebei 071001,China,2.Department of Biotechnology,College of Environmental and Chemical Engineering,Yanshan University,Qinhuangdao,Hebei 066004,3.Animal Husbandry and Fishery Bureau of Baoding,Hebei 071051,China)
Abstract:
Keywords:Ascaris suum  antibacterial peptide  cecropin P1  Pichia pastoris  antibacterial activity  
本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录!
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