| 猪MHC-Ⅰα生物素化序列融合基因的构建、表达与纯化 |
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| 引用本文： | 肖一红,刘光亮,王群,童铁钢,白宇,孟庆文,吴东来.猪MHC-Ⅰα生物素化序列融合基因的构建、表达与纯化[J].中国兽医学报,2008,28(4):456-460. |
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| 作者姓名： | 肖一红 刘光亮 王群 童铁钢 白宇 孟庆文 吴东来 |
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| 作者单位： | 中国农业科学院,哈尔滨兽医研究所,兽医生物技术国家重点实验室,黑龙江,哈尔滨,150001;中国农业科学院,研究生院,北京,100081 |
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| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划(863计划)
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黑龙江省自然科学基金 |
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| 摘 要： | 采用RT-PCR技术从猪外周血单核细胞（PBMC）中获得猪白细胞抗原基因座P1、P14等位基因的胞外区,并在其3′端拼接上依赖BirA酶的可生物素化序列（BSP）,构建了pET-P1-BSP和pET-P14-BSP高效表达载体并进行诱导表达和纯化,用SDS-PAGE和Western blotting法对表达产物进行鉴定。结果显示,成功构建了融合表达载体pET-P1-BSP和pET-P14-BSP,表达产物以包涵体的形式存在,获得高纯度的P1-BSP和P14-BSP蛋白,为进一步利用亲和素在体外构建SLA-I类分子肽四聚体奠定了基础。
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| 关 键 词： | MHC-Ⅰ SLA-Ⅰ 克隆 生物素化序列 表达 纯化 生物素化序列 融合基因 表达与纯化 Cloning swine purification expression 四聚体 类分子 体外构建 亲和素 利用 蛋白 高纯度 存在 包涵体 高效表达载体 显示 结果 Western |
| 文章编号： | 1005-4545(2008)04-0456-05 |
| 修稿时间： | 2006年6月19日 |
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