| 应用实时荧光定量TaqMan RT-PCR检测口蹄疫病毒 |
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| 引用本文： | 花群义,金宁一,周晓黎,董俊,杨云庆,徐自忠.应用实时荧光定量TaqMan RT-PCR检测口蹄疫病毒[J].中国兽医学报,2005,25(2):116-119. |
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| 作者姓名： | 花群义 金宁一 周晓黎 董俊 杨云庆 徐自忠 |
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| 作者单位： | 1. 云南出入境检验检疫局,技术中心,云南,昆明,650228
2. 解放军军需大学,军事兽医研究所,吉林,长春,130062 |
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| 基金项目： | 国家"十五"重大科技攻关项目(2001BA804A22);云南省计委科技攻关重点项目((98)636) |
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| 摘 要： | 按照口蹄疫病毒(FMDV)聚合酶3D基因序列,设计合成了引物和探针,经各反应务件的优化,建立了实时荧光定量RT-PcR技术,对细胞培养物、水泡液、水泡皮及分泌物、血液中的FMDV进行了特异性检测和敏感性试验。结果,用300nmol／L的引物浓度和200nmol／L探针浓度,获得的CT值较小,而△Rn最大;可检测到相当于9．1TCID50的病毒RNA;与VSV和其他水泡性病毒不发生交叉反应;制作的标准曲线中各浓度范围内有极好的线性关系,且线性范围宽,相关系数为0．984;组内和组间试验重复性的变异系数(CV)分别为5．4％和6．7％;与常规RT-PCR相比较,该方法具有快速、特异、敏感、可定量,并可同时检测大量样品等优点。
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| 关 键 词： | 口蹄疫病毒 荧光定量RT-PCR 实时检测 口蹄疫 |
| 文章编号： | 1005-4545(2005)02-0116-03 |
| 修稿时间： | 2003年12月29 |
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