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犬细小病毒Taq Man荧光定量PCR检测方法的建立与初步应用
引用本文:刘海防,胡传伟,谢之景,姜世金,张兴晓,倪长鹏,贾赟,杨笃宝.犬细小病毒Taq Man荧光定量PCR检测方法的建立与初步应用[J].中国兽医学报,2010,30(5).
作者姓名:刘海防  胡传伟  谢之景  姜世金  张兴晓  倪长鹏  贾赟  杨笃宝
作者单位:1. 山东农业大学动物科学院,山东泰安,271018
2. 辽宁出入境检验检疫局技术中心,辽宁大连,116001
基金项目:山东农业大学青年科技创新基金资助项目(23204); 国家质检总局基金资助项目(2005IK047)
摘    要:根据GenBank中CPV VP2蛋白基因序列,选择CPV VP2基因保守序列,分别设计1对特异性引物和TaqMan探针,建立了CPV Taq Man荧光定量PCR检测方法。对CPV Taq Man荧光定量PCR的反应体系和反应条件进行优化,并对其特异性和敏感性进行了测定,建立标准曲线。结果,CPV Taq Man荧光定量PCR对CPV检测阳性,并能对10拷贝/μL的CPV模板检测阳性,标准曲线的相关系数为0.9992,但对非CPV模板检测阴性。结果表明,所建立的CPV Taq Man荧光定量PCR具有很好的特异性和敏感性,标准曲线具有很强的实用性。同时对CPV Taq Man荧光定量PCR与CPV PCR进行了比较试验,结果前者比后者的敏感性高100倍。采用CPVHA、CPV PCR与CPV Taq Man荧光定量PCR对55份临床样品进行检测,CPV HA对30份样品检测阳性,CPVPCR对40份样品检测阳性,CPV Taq Man荧光定量PCR对47份样品检测阳性。这表明,CPV Taq Man荧光定量PCR对样品的检出率最高,具有特异、敏感、快速的特点,适用临床样品的检测。

关 键 词:犬细小病毒  实时定量PCR  Taq  Man荧光探针  

Establishment and preliminary application of a Taq Man-based real-time PCR method for detection of canine parvovirus
LIU Hai-fang,HU Chuan-wei,XIE Zhi-jing,JIANG Shi-jin,ZHANG Xing-xiao,NI Chang-peng,JIA Yun,YANG Du-bao.Establishment and preliminary application of a Taq Man-based real-time PCR method for detection of canine parvovirus[J].Chinese Journal of Veterinary Science,2010,30(5).
Authors:LIU Hai-fang  HU Chuan-wei  XIE Zhi-jing  JIANG Shi-jin  ZHANG Xing-xiao  NI Chang-peng  JIA Yun  YANG Du-bao
Institution:LIU Hai-fang1,HU Chuan-wei2,XIE Zhi-jing1,JIANG Shi-jin1,ZHANG Xing-xiao1,NI Chang-peng2,JIA Yun2,YANG Du-bao1 (1.Animal Science , Technology Institule,Sh,ong Agricultural University,Taian,Sh,ong 271018,China,2.Liaoning Entry-Exit Inspection , Quarantine Bureau,Dalian,Liaoning 116001,China)
Abstract:
Keywords:canine parvovirus  real-time PCR  Taq Man fluorescence probe  
本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录!
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