孕牛血清中早孕因子的分离纯化与鉴定

为了从妊娠4~5个月健康孕牛血清中分离得到纯化的早孕因子(EPF),通过DEAE-Sepharos F.F离子交换层析,CM–Sepharose F.F离子交换层析,Con A-Sepharose 4B亲和层析和Heparin Sepharose Cl 6B亲和层析分离纯化技术,从孕牛血清中分离出纯化出EPF。采用玫瑰花环抑制实验(Ea-RIT)对各阶段产物EPF活性进行检测,最终纯化出具有早孕因子活性的HE-2成分。将HE-2经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)出现分子量为53.6KU蛋白质条带。该方法得到分离纯化的EPF,为进一步研制早孕因子单克隆抗体的制备做准备。