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克氏针茅ISSR-PCR反应体系的建立与优化
引用本文:隋晓青,王堃.克氏针茅ISSR-PCR反应体系的建立与优化[J].草业学报,2008,17(3):71-78.
作者姓名:隋晓青  王堃
作者单位:中国农业大学动物科技学院草地研究所,北京,100094
摘    要:采用正交试验与单因素设计相结合的方法,对克氏针茅ISSR-PCR反应体系中的5种主要因素(模板DNA、Mg2 、TaqDNA聚合酶、dNTP及引物)进行优化筛选,确立了适合克氏针茅ISSR分析的优化反应体系。在25μL反应体系中各反应成分为:模板DNA 50 ng,Mg2 1.5 mmol/L,dNTP 0.2 mmol/L,引物0.8μmol/L,TaqDNA聚合酶1 U,10×buffer 2.5μL。这一体系的建立为今后利用ISSR技术进行克氏针茅遗传多样性分析、遗传图谱构建和基因定位奠定了技术基础。

关 键 词:克氏针茅  ISSR  反应体系  优化

Establishment and optimization of the ISSR-PCR reaction system in Stipa krylovii
SUI Xiao-qing,WANG Kun.Establishment and optimization of the ISSR-PCR reaction system in Stipa krylovii[J].Acta Prataculturae Sinica,2008,17(3):71-78.
Authors:SUI Xiao-qing  WANG Kun
Abstract:
Keywords:Stipa krylovii  ISSR  reaction system  optimization
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