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sikFBA4基因启动子的克隆及低温表达模式分析
引用本文:张尧,李忠晴,王爱英,祝建波.sikFBA4基因启动子的克隆及低温表达模式分析[J].草业学报,2018,27(12):199-207.
作者姓名:张尧  李忠晴  王爱英  祝建波
作者单位:农业生物技术重点实验室,石河子大学生命科学学院,新疆石河子832000;农业生物技术重点实验室,石河子大学生命科学学院,新疆石河子832000;农业生物技术重点实验室,石河子大学生命科学学院,新疆石河子832000;农业生物技术重点实验室,石河子大学生命科学学院,新疆石河子832000
基金项目:国家自然基金项目(31360053)资助。
摘    要:天山雪莲生长于常年积雪覆盖高海拔处的高山区域,具有很强的极端低温生境适应能力,属于研究植物低温适应的良好模式植物。前期的研究表明,sikFBA4基因可以显著提高番茄的抗寒能力。为进一步研究sikFBA4基因的耐寒响应模式,以天山雪莲为材料,采用实时荧光定量PCR分析sikFBA4在低温胁迫下的表达模式;利用高效热不对称PCR法(Hi-Tail PCR)克隆sikFBA4启动子序列并进行生物信息学分析。为分析PsikFBA4序列克隆的完整性及转录表达特性,将PsikFBA4与GUS基因融合在烟草中进行瞬时表达。结果表明,sikFBA4在低温胁迫条件下的表达发生瞬时显著上调,并在1 h达到峰值,而后表达下调。通过启动子克隆分析,在PsikFBA4序列-1648 bp位置处具有冷响应元件LTRE;进一步的GUS染色和酶活力测定结果表明,低温能够显著提高GUS基因的表达活性,说明sikFBA4属于低温诱导型基因。SikFBA4基因启动子的克隆、序列分析以及表达分析,为进一步探究雪莲果糖-1,6-二磷酸醛缩酶(sikFBAs)基因的表达与调控机制奠定了基础。

关 键 词:天山雪莲  sikFBA4  高效热不对称PCR  启动子  GUS
收稿时间:2017-12-28
修稿时间:2018-05-11

Promoter cloning and analysis of low temperature-induced expression of sikFBA4 from Saussurea involucrata
ZHANG Yao,LI Zhong-qing,WANG Ai-ying,ZHU Jian-bo.Promoter cloning and analysis of low temperature-induced expression of sikFBA4 from Saussurea involucrata[J].Acta Prataculturae Sinica,2018,27(12):199-207.
Authors:ZHANG Yao  LI Zhong-qing  WANG Ai-ying  ZHU Jian-bo
Institution:College of Life Science, Shihezi University, Shihezi 832000, China
Abstract:
Keywords:Saussurea involucrata   sikFBA4  Hi-Tail PCR  promoter  GUS  
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