| FADS1基因对猪不饱和脂肪酸含量的影响研究 |
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| 引用本文： | 张天天,华再东,任红艳,顾浩,周彬,毕延震.FADS1基因对猪不饱和脂肪酸含量的影响研究[J].中国畜牧兽医,2023,50(2):451-459. |
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| 作者姓名： | 张天天 华再东 任红艳 顾浩 周彬 毕延震 |
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| 作者单位： | 1. 湖北工业大学生物工程与食品学院, 发酵工程教育部重点实验室, 武汉 430068;2. 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所, 动物胚胎工程及分子育种湖北省重点实验室, 武汉 430064 |
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| 基金项目： | 湖北省重点研发计划(青年科学家项目)(2021BBA221);湖北省农业科技创新中心项目(2022-620-000-001-20);湖北省农业科学院领军人才(L2018015) |
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| 摘 要： | 【目的】研究脂肪酸去饱和酶1(fatty acid desaturases 1,FADS1)基因对不饱和脂肪酸代谢的调控作用,为揭示其分子机制提供参考。【方法】利用PCR扩增猪FADS1基因的CDS区,将目的基因与pcDNA3.1(-)骨架载体连接获得重组表达载体pcDNA3.1-FLAG-FADS1,将重组表达载体瞬时转染宁乡猪肾成纤维细胞,转染后24、48 h分别收集细胞,利用实时荧光定量PCR和Western blotting检测FADS1基因的表达情况,经过遗传霉素(geneticin,G418)筛选之后获得稳定表达FADS1基因的细胞系,命名为1-4#。利用甘油三酯检测试剂盒检测野生型和1-4#细胞甘油三酯含量变化;利用气相色谱质谱法(gas chromatography-mass spectrometer,GC-MS)检测野生型和1-4#细胞不饱和脂肪酸含量变化情况。【结果】成功获得过表达载体pcDNA3.1-FLAG-FADS1,在转录水平和蛋白水平检测均有过表达效果。通过G418筛选出1株稳定过表达FADS1基因的单克隆细胞。甘油三酯含量测定结果显示,与野生型宁乡猪肾成纤维细胞相比,过表达FADS1的宁乡猪肾成纤维细胞中甘油三酯的含量显著降低(P＜0.05)。不饱和脂肪酸检测结果显示,过表达FADS1后,总脂肪酸的含量极显著升高(P＜0.01),提高1.8倍,多不饱和脂肪酸(polyunsaturated fatty acid,PUFA)中ω-3 PUFA、ω-6 PUFA含量均极显著升高(P＜0.01),二十碳五烯酸(eicosapentaenoic acid,EPA)、二十二碳五烯酸(docosapentaenoic acid,DPA)、二十二碳六烯酸(docosahexaenoic acid,DHA)的相对含量极显著提高(P＜0.01),ω-3/ω-6值显著提高(P＜0.05)。【结论】成功构建超表达载体pcDNA3.1-FLAG-FADS1,并在宁乡猪肾成纤维细胞中成功筛选到了1株稳定超表达FADS1基因的单克隆细胞1-4#,经检测,FADS1基因超表达能显著降低细胞中甘油三酯含量、提高ω-3 PUFA含量及占比,提高ω-3/ω-6值。
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| 关 键 词： | FASD1基因 过表达 脂肪酸 ω-3 ω-6 |
| 收稿时间： | 2022-07-19 |
Effect of FADS1 Gene on Unsaturated Fatty Acid Synthesis |
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| ZHANG Tiantian,HUA Zaidong,REN Hongyan,GU Hao,ZHOU Bin,BI Yanzhen.Effect of FADS1 Gene on Unsaturated Fatty Acid Synthesis[J].China Animal Husbandry & Veterinary Medicine,2023,50(2):451-459. |
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| Authors: | ZHANG Tiantian HUA Zaidong REN Hongyan GU Hao ZHOU Bin BI Yanzhen |
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| Institution: | 1. Key Laboratory of Fermentation Engineering, Ministry of Education, College of Biological Engineering and Food, Hubei University of Technology, Wuhan 430068, China;2. Key Laboratory of Animal Embryo Engineering and Molecular Breeding of Hubei Province, Institute of Animal Science and Veterinary Medicine, Hubei Academy of Agricultural Sciences, Wuhan 430064, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | FADS1 gene overexpression fatty acids ω-3 ω-6 |
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