猫importin基因生物信息分析及其在犬细小病毒感染F81细胞表达的动态变化

试验旨在系统研究猫源不同亚型importin（importin α1、importin α3、importin α4、importin α5、importin α6、importin α7、importin α8和importin β）基因序列和蛋白基本特性，探讨其在犬细小病毒（canine parvovirus，CPV）感染F81细胞表达的动态变化。本研究利用RT-PCR方法扩增F81细胞中improtin基因全长序列，应用生物学软件预测其氨基酸序列及编码蛋白的结构及功能；进一步利用实时荧光定量RT-PCR技术检测importin基因在CPV感染F81细胞后24、48和72 h表达水平。结果显示，不同亚型importin α基因全长约在1 500 bp，而importin β基因全长为2 600 bp；预测importin亚型蛋白序列发现，其等电点均在4.60左右，且发现importin α1、importin α5、importin α6、importin α7和importin β为不稳定蛋白；分析发现这些importin蛋白均无信号肽、无跨膜区、无细胞定位；采用Predictprotein软件预测蛋白二级结构，结果显示importin亚型蛋白序列主要以α-螺旋和无规则卷曲形式存在。实时荧光定量RT-PCR结果显示，CPV感染F81细胞后随着感染时间的延长importin α1（P<0.01）和importin β表达量逐渐降低，而importin α3、importin α4、importin α5、importin α6（P<0.01）、importin α7（P<0.01）和importin α8（P<0.01）表达量逐渐提高，其中importin α8在病毒感染细胞后表达量最高。本研究结果为进一步分析CPV进入细胞核的转运机制及开发治疗药物相关研究奠定基础。

Bioinformatics Analysis of Feline importin Gene and Its Dynamic Expression in F81 Cells Infected with Canine Parvovirus