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| 鸡传染性支气管炎病毒H52株TaqMan-MGB 荧光定量RT-PCR检测方法的建立 | |
| 引用本文： | 梁耀峰,郭霄峰,宋立,刘洋.鸡传染性支气管炎病毒H52株TaqMan-MGB 荧光定量RT-PCR检测方法的建立[J].中国畜牧兽医,2012,39(4):169-173. |
| 作者姓名： | 梁耀峰 郭霄峰 宋立 刘洋 |
| 作者单位： | 1. 华南农业大学兽医学院,广东广州510642;中国兽医药品监察所,北京100081 2. 华南农业大学兽医学院,广东广州,510642 3. 中国兽医药品监察所,北京,100081 4. 中国兽医药品监察所,北京100081;扬州大学兽医学院,江苏扬州225009 |
| 基金项目： | “十一五”国家支撑计划子课题 |
| 摘 要： | 本研究建立了一种快速的鸡传染性支气管炎病毒(IBV)H52株定量检测方法,为进一步研究疫苗的效价检测和质量监控新方法奠定基础。针对IBV核蛋白(N)基因,设计特异的H52株荧光定量PCR检测引物和TaqMan-MGB探针,优化反应体系和条件后进行特异性、敏感性、重复性试验,探讨荧光定量RT-PCR与EID50方法测定病毒含量的相关性,并通过体外转录技术对病毒基因拷贝数进行定量分析。该方法特异性强,与其他禽源病毒均无交叉反应;该方法可检测到5.60×101拷贝/μL的病毒核酸,与常规PCR相比,敏感性高10倍;重复性试验的变异系数为0.9%~3.2%;与EID50检测结果的相关系数r＝0.934,两种方法在检测H52株病毒效价上具有很好的相关性。本研究建立的TaqMan-MGB荧光定量RT-PCR方法,适合于对鸡传染性支气管炎病毒H52株病毒含量的快速定量检测。 |
| 关 键 词： | 荧光定量RT-PCR TaqMan-MGB探针 鸡传染性支气管炎病毒 H52 |
| 收稿时间： | 2011-10-28 |
Establishment of TaqMan-MGB Fluorescence Quantitative RT-PCR Assay for Detection of Avian Infectious Bronchitis Virus H52 Strain |
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| LIANG Yao-feng , GUO Xiao-feng , SONG Li , LIU Yang.Establishment of TaqMan-MGB Fluorescence Quantitative RT-PCR Assay for Detection of Avian Infectious Bronchitis Virus H52 Strain[J].China Animal Husbandry & Veterinary Medicine,2012,39(4):169-173. | |
| Authors: | LIANG Yao-feng GUO Xiao-feng SONG Li LIU Yang |
| Institution: | 1. College of Veterinary Medicine,South China Agricultural University,Guangzhou 510642,China;2. China Institute of Veterinary Drug Control,Beijing 100081,China;3. College of Veterinary Medicine,Yangzhou University,Yangzhou 225009,China |
| Abstract: | |
| Keywords: | luorescence quantitative RT-PCR TaqMan-MGB probe avian infectious bronchitis virus H52 |
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