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| 半定量RT-PCR法检测原代培养脂肪细胞生脂基因mRNA转录表达 | |
| 引用本文： | 卢建雄,臧荣鑫,潘和平,杨具田,陈粉粉,杨公社.半定量RT-PCR法检测原代培养脂肪细胞生脂基因mRNA转录表达[J].中兽医医药杂志,2005,24(6):16-18. |
| 作者姓名： | 卢建雄 臧荣鑫 潘和平 杨具田 陈粉粉 杨公社 |
| 作者单位： | 1. 西北民族大学生命科学与工程学院,甘肃兰州,730030;西北农林科技大学动物脂肪沉积和肌肉发育实验室 2. 西北民族大学生命科学与工程学院,甘肃兰州,730030 3. 西北农林科技大学动物脂肪沉积和肌肉发育实验室 |
| 摘 要： | 在原代培养脂肪细胞生脂机制研究中,为了检测生脂基因ACCl和FAS mRNA表达水平变化,细胞总RNA经反转录合成cDNA,以β-actin为内参照,分别与ACCl和FAS等基因同管扩增.通过探讨和优化PCR体系中引物设计、退火温度、MgCl2浓度和循环次数等参数,以及引物对间的扩增竞争,建立了检测脂肪细胞生脂相关基因mRNA表达的半定量多重RT-PCR体系.结果显示,RT-PCR产物经电泳后,β-actin及生脂基因电泳带清晰,与预期产物大小一致,引物对间无扩增竞争,其扩增效率和特异性与单重RT-PCR体系相同,实验重复性好.因此,该方法和体系可用于快速、灵敏、可靠地检测特异基因mRNA的表达. |
| 关 键 词： | 原代培养脂肪细胞 生脂基因 半定量RT-PCR |
| 文章编号： | 1000-6354（2005）06-0016-03 |
| 收稿时间： | 2005-08-12 |
| 修稿时间： | 2005年8月12日 |
Semi-quantitative RT-PCR method to measure mRNA expression for lipogenic genes in primary culture adipocytes |
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| LU Jian-xiong,ZANG Rong-xin,PAN He-ping,YANG Ju-tian.Semi-quantitative RT-PCR method to measure mRNA expression for lipogenic genes in primary culture adipocytes[J].Journal of Traditional Chinese Veterinary Medicine,2005,24(6):16-18. | |
| Authors: | LU Jian-xiong ZANG Rong-xin PAN He-ping YANG Ju-tian |
| Institution: | College of Life Science and Engineering,Northwest Minorities University,Lanzhou Gansu 730030,China |
| Abstract: | |
| Keywords: | primary culture adipocyte lipogenetic gene semi-quantitative RT-PCR |
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