基于iTRAQ技术分析家蚕微孢子虫感染家蚕精巢的蛋白质组表达变化 |
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引用本文: | 唐旭东,叶青云,于洁,徐莉,沈中元.基于iTRAQ技术分析家蚕微孢子虫感染家蚕精巢的蛋白质组表达变化[J].蚕业科学,2017,43(2):245-252. |
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作者姓名: | 唐旭东 叶青云 于洁 徐莉 沈中元 |
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作者单位: | 江苏科技大学生物技术学院,江苏镇江212018;中国农业科学院蚕业研究所,江苏镇江212018;江苏科技大学生物技术学院,江苏镇江,212018 |
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基金项目: | 现代农业产业技术体系建设专项 |
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摘 要: | 为了获取家蚕微孢子虫(Nosema bombycis,Nb)与宿主家蚕之间互作的新线索,利用定量蛋白质组学同位素标记相对定量和绝对定量(i TRAQ)技术分析感染与未感染Nb的家蚕5龄末幼虫精巢组织的蛋白质组表达变化,在置信度≥95%的1 326个蛋白质中,共发现78个蛋白质的表达量发生了变化,其中63个蛋白质表达上调,15个蛋白质表达下调。GO注释差异表达蛋白质参与了14个生物学过程,以参与代谢过程和细胞内过程的蛋白质占比较高;参与的细胞组分有9个,以胞外结构域占比较高;参与的分子功能有4个,以催化活性及蛋白质结合的占比较高。KEGG通路分析差异表达蛋白质共参与57个信号转导通路,主要包括代谢通路,甘氨酸、丝氨酸、苏氨酸代谢通路以及溶酶体途径。利用qRT-PCR测定随机选取的8个差异表达蛋白质的编码基因mRNA转录水平变化,结果有5个基因mRNA的转录变化与i TRAQ检测蛋白质的表达变化趋势一致,而另外3个基因mRNA转录变化与蛋白质的表达变化不一致。研究结果显示差异蛋白质与能量代谢、氨基酸转运、发育调节、免疫调控等多个生物学过程有关,提示Nb与宿主家蚕之间存在复杂的相互作用关系。
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关 键 词: | 家蚕 精巢 家蚕微孢子虫 定量蛋白质组学 GO注释 KEGG通路 基因表达 |
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