一个二化性家蚕醛酮还原酶基因的克隆及序列与表达分析 |
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引用本文: | 陈艳荣,朱娟,蒋涛,谭志承,陈艳花,唐顺明,沈兴家.一个二化性家蚕醛酮还原酶基因的克隆及序列与表达分析[J].蚕业科学,2019,45(2):187-194. |
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作者姓名: | 陈艳荣 朱娟 蒋涛 谭志承 陈艳花 唐顺明 沈兴家 |
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作者单位: | 江苏科技大学生物技术学院,江苏省蚕桑生物学与生物技术重点实验室,江苏镇江212018;黄山学院生命与环境科学学院,安徽黄山245041;江苏科技大学生物技术学院,江苏省蚕桑生物学与生物技术重点实验室,江苏镇江212018;江苏科技大学生物技术学院,江苏省蚕桑生物学与生物技术重点实验室,江苏镇江212018;中国农业科学院蚕业研究所,农业农村部蚕桑遗传改良重点实验室,江苏镇江212018 |
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基金项目: | 国家自然科学基金;江苏省自然科学基金 |
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摘 要: | 醛酮还原酶(aldo-keto reductase,AKR)超级家族成员以还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸作为其辅酶,将醛酮类化合物还原成相应的醇类,其作用底物范围广泛,包括糖类、脂肪醛和甾体类激素等,在许多重要生物学反应中发挥关键作用。以二化性家蚕品系秋丰为材料,利用RT-PCR分别从滞育命运组和非滞育命运组克隆出AKR蛋白的cDNA序列。AKR蛋白序列由343个氨基酸组成,与黑腹果蝇和人的AKR分别有43%和38%的序列一致性。基于蛋白质序列构建的系统发育树显示,家蚕AKR蛋白属于AKR2E亚家族,其氨基酸序列与该家族成员序列一致性超过30%,故命名为AKR2E-like。将akr2e-like基因的cDNA序列克隆进表达载体pET-28a(+)中进行原核重组表达,SDS-PAGE电泳和Western blot分析显示重组蛋白被成功表达。qRT-PCR分析表明,ark2e-like基因表达受发育环境调节:在滞育诱导条件下,该基因在家蚕化蛹早期的表达量持续增加,在化蛹后第4天mRNA丰度达到最高值;而在非滞育诱导条件下,化蛹后ark2e-like基因表达量并无明显波动。上述结果表明,ark2e-like基因有可能在家蚕二化性品系的滞育准备期起关键作用。
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关 键 词: | 醛酮还原酶 滞育准备 家蚕 表达 |
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