利用家蚕杆状病毒表达系统表达人γ干扰素及产物的抗病毒活性检测 |
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引用本文: | 曾振,李家磊,刘兴健,唐平,李轶女,张志芳,沈兴家,易咏竹.利用家蚕杆状病毒表达系统表达人γ干扰素及产物的抗病毒活性检测[J].蚕业科学,2021,47(3):240-246. |
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作者姓名: | 曾振 李家磊 刘兴健 唐平 李轶女 张志芳 沈兴家 易咏竹 |
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作者单位: | 江苏科技大学生物技术学院,江苏省蚕桑生物学与生物技术重点实验室,江苏镇江 212100;中国农业科学院蚕业研究所,农业农村部蚕桑遗传改良重点实验室,江苏镇江 212100;中国农业科学院生物技术研究所,北京 100081;江苏科技大学生物技术学院,江苏省蚕桑生物学与生物技术重点实验室,江苏镇江 212100 |
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基金项目: | 国家自然科学基金;国家自然科学基金;宁夏回族自治区重点研发计划项目 |
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摘 要: | 干扰素-γ(IFN-γ)是免疫反应中重要的免疫调节因子,对多种免疫细胞具有激活作用.利用家蚕杆状病毒表达系统在家蚕中高效表达具有活性的人γ干扰素(hIFN-γ),首先根据家蚕密码子偏好性对hIFN-γ的编码基因进行优化合成,将优化合成后的序列克隆到杆状病毒转移载体pBR中,然后与orf1629基因缺失的失活拯救型杆状病毒BmBacmid共转染BmN细胞,获得重组病毒reBmBac-hIFN-γ,最后利用获得的重组病毒感染家蚕并收获表达产物.采用微量细胞病变抑制法,在Vero/VSV-GFP系统中检测到重组hIFN-γ 的效价达到(3.69±2.02)×106 IU/mL.此外,重组hIFN-γ可以抑制猪蓝耳病病毒(PRRSV)在Marc-145细胞中的增殖.上述结果为利用家蚕生物反应器高效生产具有活性的人γ干扰素奠定了试验基础.
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关 键 词: | 人γ扰素 杆状病毒表达系统 家蚕 抗病毒活性 |
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