| 稳定转化家蚕BmN细胞表达人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子 |
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| 引用本文： | 李曦,赵越,周文林,曹广力,薛仁宇,贡成良.稳定转化家蚕BmN细胞表达人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子[J].蚕业科学,2009,35(2). |
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| 作者姓名： | 李曦 赵越 周文林 曹广力 薛仁宇 贡成良 |
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| 作者单位： | 苏州大学基础医学与生物科学学院,江苏苏州,215123;苏州大学基础医学与生物科学学院,江苏苏州,215123;苏州大学基础医学与生物科学学院,江苏苏州,215123;苏州大学基础医学与生物科学学院,江苏苏州,215123;苏州大学基础医学与生物科学学院,江苏苏州,215123;苏州大学基础医学与生物科学学院,江苏苏州,215123 |
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| 基金项目： | 国家重点基础研究发展规划(973计划) |
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| 摘 要： | 为了建立稳定转化家蚕细胞持续表达外源基因的技术体系,构建了基于piggyBac转座子的带有人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子基因(hGM-CSF)和新霉素抗性基因(neo)表达元件的转基因载体pigA3GFP-IE-neo-FH-hGM-CSF-polyA-fib-L-intron1,以及带有hGM-CSF和吉欧霉素(zeocin)抗性基因的昆虫细胞转化载体pIZT-IE-hGM-CSF,分别转染家蚕卵巢BmN细胞,并以含相应抗生素G418或zeocin的培养液筛选,得到稳定的转化细胞系FH-hGM-CSF和IE-hGM-CSF。ELISA检测结果显示,hGM-CSF在FH-hGM-CSF和IE-hGM-CSF转化细胞系的表达水平分别为1.534 55 fg/个细胞和2.227 38 fg/个细胞。
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| 关 键 词： | piggyBac转座子 pIZT/V5-His载体 家蚕BmN细胞 人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子 |
Expression of hGM-CSF in Stably Transformed BmN Cells of Bombyx mori |
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| LI Xi,ZHAO Yue,ZHOU Wen-Lin,CAO Guang-Li,XUE Ren-Yu,GONG Cheng-Liang.Expression of hGM-CSF in Stably Transformed BmN Cells of Bombyx mori[J].Acta Sericologica Sinica,2009,35(2). |
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| Authors: | LI Xi ZHAO Yue ZHOU Wen-Lin CAO Guang-Li XUE Ren-Yu GONG Cheng-Liang |
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| Institution: | LI Xi ZHAO Yue ZHOU Wen-Lin CAO Guang-Li XUE Ren-Yu GONG Cheng-Liang(College of Fundamental Medicine & Life Sciences,Soochow University,Suzhou Jiangsu 215123,China) |
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| Abstract: | In order to generate stable transformed Bombyx mori cell line for expressing target gene continuously,two transgenic vectors,pigA3GFP-IE-neo-FH-hGM-CSF-polyA-fib-L-intron1 containing a human granulocyte-macrophage colony-stimulating factor(hGM-CSF) gene and a neomycin resistance gene based on piggyBac transposon,and pIZT-IE-hGM-CSF containing a hGM-CSF gene and a zeocin resistance gene were constructed.Silkworm ovarian BmN cells were transfected with the two transgenic vectors respectively,and screened with... |
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| Keywords: | piggyBac transposon pIZT/V5-His vector Transformed BmN cell hGM-CSF |
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