| 家蚕凋亡蛋白酶(caspase-1)基因在大肠杆菌中的表达 |
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| 引用本文： | 王海霞,王文兵,李兵,沈卫德.家蚕凋亡蛋白酶(caspase-1)基因在大肠杆菌中的表达[J].蚕业科学,2007,33(1):129-132. |
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| 作者姓名： | 王海霞 王文兵 李兵 沈卫德 |
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| 作者单位： | 1. 江苏大学生命科学研究院,镇江,212013
2. 苏州大学生命科学学院,苏州,215123 |
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| 基金项目： | 国家重点基础研究发展计划(973计划)
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江苏省教育厅高校科研项目
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江苏大学校科研和教改项目 |
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| 摘 要： | 为了研究家蚕凋亡蛋白酶(caspase-1)的原核表达及剪切方式,用PCR法扩增出家蚕caspase-1基因的cD-NA,然后插入pET28a载体,得到阳性质粒pET28a-caspase-1,并转化感受态细胞BL21,用异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导了caspase-1蛋白的表达。应用SDS-PAGE和Western blot分析对其性质作检测,诱导3 h后caspase-1蛋白得到剪切,5 h开始降解。研究结果表明,caspase-1基因可在大肠杆菌BL21中诱导表达,并且能够进行自我剪切。
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| 关 键 词： | 凋亡蛋白酶基因 表达 剪切 家蚕 大肠杆菌BL21 |
| 文章编号： | 0257-4799(2007)01-0129-04 |
| 修稿时间： | 2006-07-30 |
Expression of Bombyx mori caspase-1 Gene in Escherichia coli |
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| WANG Hai-Xia,WANG Wen-Bing,LI Bing,SHEN Wei-De.Expression of Bombyx mori caspase-1 Gene in Escherichia coli[J].Acta Sericologica Sinica,2007,33(1):129-132. |
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| Authors: | WANG Hai-Xia WANG Wen-Bing LI Bing SHEN Wei-De |
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| Institution: | 1 Institute of Life Science, Jiangsu Univeisity, Zhenjiang Jiangsu 212013, China 2 College of Life Science, Soochow University, Suzhou Jiangsu 215123, China |
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| Abstract: | To study the prokaryotic expression and modification of silkworm apoptosis protease caspase-1,the cDNA of silkworm caspase-1 gene was amplified by PCR and inserted into the plasmid pET28a and a prokaryotic expression vector was obtained to transform BL21 cells.The Caspase-1 was expressed under inducement of IPTG identified by SDS-PAGE and Western blot.The results showed that Caspase-1 product was cleaved after induced with IPTG for 3 hours and began to degrade in 5 hours.It indicated that Caspase-1 product can be expressed and self-cleavaged in E.coli BL21. |
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| Keywords: | caspase-1 gene Expression Cleavage Bombyx mori Escherichia coli BL21 |
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