| 利用RGR核酶结构拓展家蚕CRISPR基因组编辑系统的应用研究 |
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| 引用本文： | 张启超,宋红生,曾保胜,陈树清,许军,李芝倩,张忠杰,陈旭.利用RGR核酶结构拓展家蚕CRISPR基因组编辑系统的应用研究[J].蚕业科学,2018,44(2):226-232. |
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| 作者姓名： | 张启超 宋红生 曾保胜 陈树清 许军 李芝倩 张忠杰 陈旭 |
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| 作者单位： | 上海大学生命科学学院,上海,201900;中国科学院上海生命科学研究院植物生理生态研究所,上海,200032 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金;国家自然科学基金 |
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| 摘 要： | 针对目前家蚕基因组编辑平台在基因组特定位点的靶点选择、多靶点同时编辑等方面的技术瓶颈,利用家蚕卵巢培养细胞系(Bm N)验证含有双核酶结构的RGR(Ribozyme-gRNA-Ribozyme)在CRISPR/Cas9基因组编辑系统中的应用效果,用以拓展现有CRISPR/Cas9系统的靶点范围。研究结果显示,采用Cas9系统和Cpf1系统,RGR结构在Bm N细胞中具有良好的定点编辑效果,可成功实现对内源、外源靶基因序列的剪切,且对内外源基因具有高效编辑作用,表明RGR结构可应用于家蚕CRISPR/Cas9和CRISPR/Cpf1基因组编辑系统。利用RGR结构的自剪切功能不仅可以拓展家蚕基因组靶基因的范围,还为进一步实现多靶点编辑打下了基础。
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| 关 键 词： | CRISPR/Cas9系统 CRISPR/Cpf1系统 RGR核酶结构 家蚕基因组编辑 家蚕卵巢培养细胞 |
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