| 鸭坦布苏病毒和产蛋下降综合征病毒二重PCR检测方法的建立 |
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| 引用本文： | 孙敏华,李林林,董嘉文,袁建丰,邝瑞欢,胡奇林.鸭坦布苏病毒和产蛋下降综合征病毒二重PCR检测方法的建立[J].广东畜牧兽医科技,2015(1):29-33. |
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| 作者姓名： | 孙敏华 李林林 董嘉文 袁建丰 邝瑞欢 胡奇林 |
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| 作者单位： | 广东省农业科学院动物卫生研究所,广东省畜禽疫病防治研究重点实验室/广东省兽医公共卫生公共实验室;福建农业科学院畜牧兽医研究所 |
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| 基金项目： | 公益性行业(农业)科研专项(201003012);广东省科技计划项目(2012A020100001,2012B020306009,2012B010300030);广东省农业科学院院长基金项目(201436,201412);广州市科技计划项目(2014Y2-00003) |
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| 摘 要： | 参考Gen Bank上已发表的鸭坦布苏病毒(DTMUV)NS5基因序列和产蛋下降综合征病毒(EDSV)五邻体(penton)基因序列,分别设计了检测DTMUV和EDSV的特异性引物,扩增目的片段大小分别为242 bp和181 bp。通过退火温度及引物浓度的优化,建立了针对这两种病毒的二重PCR检测方法。特异性试验结果表明,该方法可以同时检测DTMUV和EDSV,且不与鸭肝炎病毒、鸭瘟病毒、番鸭呼肠孤病毒、小鹅瘟病毒、番鸭细小病毒、H9亚型禽流感病毒、新城疫病毒以及大肠杆菌的核酸发生交叉反应;敏感性试验表明,该方法对DTMUV的最低检出限为590个拷贝,对EDSV的最低检出限为3 260个拷贝;该方法重复性良好,对不同批次的样品扩增效果良好。通过检测两种病毒感染的阳性病料各10份,结果显示,该二重PCR检测方法对阳性样品的检出率可达100%。这表明该方法可以用于鸭坦布苏病毒和产蛋下降综合征病毒的检测。
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| 关 键 词： | 鸭坦布苏病毒 产蛋下降综合征病毒 二重PCR |
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