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检测鸭坦布苏病毒NS1抗体ELISA方法的建立
引用本文:孙敏华,郭建伟,李林林,董嘉文,邝瑞欢,吴玄光,张建峰,胡奇林,张春红.检测鸭坦布苏病毒NS1抗体ELISA方法的建立[J].广东畜牧兽医科技,2017,42(1).
作者姓名:孙敏华  郭建伟  李林林  董嘉文  邝瑞欢  吴玄光  张建峰  胡奇林  张春红
作者单位:1. 广东省农业科学院动物卫生研究所,广东省畜禽疫病防治研究重点实验室,广东省兽医公共卫生公共实验室,广东广州 510640;2. 广东省农业科学院动物卫生研究所,广东省畜禽疫病防治研究重点实验室,广东省兽医公共卫生公共实验室,广东广州 510640;华南农业大学兽医学院,广东广州 510642;3. 华南农业大学兽医学院,广东广州,510642;4. 福建农业科学院畜牧兽医研究所,福建福州,350013
基金项目:广东省科技计划项目,广东省农业科学院院长基金项目
摘    要:为了检测鸭群中鸭坦布苏病毒的血清学流行情况,本研究在前期成功表达鸭坦布苏病毒NS1蛋白的基础上,建立了检测鸭血清中鸭坦布苏病毒抗体的间接ELISA方法。棋盘法确定了当纯化的NS1蛋白包被量为0.188μg/孔,待检血清1:200稀释,HRP标记的兔抗鸭二抗1:16000倍稀释时反应条件最佳。在最佳反应条件下,阴阳性临界值判定标准为0.467。用建立的间接ELISA方法对番鸭细小病毒、鹅细小病毒、鸭肝炎病毒、鸭疫里默氏杆菌阳性血清进行了检测,均无交叉反应,表明该方法具有良好的特异性。批内和批间重复试验的最大变异系数分别为6%和10%,显示该方法具有很好的稳定性。用建立的ELISA方法检测临床鸭坦布苏病毒感染鸭及攻毒蛋鸭的55份临床血清样品,测得52份为阳性,阳性率为94.5%,对36份阴性鸭群血清样品进行检测,36份为阴性,阴性率为100%。该方法为鸭坦布苏病毒的诊断和流行病学监测奠定了基础。

关 键 词:鸭坦布苏病毒  NS1蛋白  ELISA

Establishment of an ELISA Assay for the Detection of NS1 Protein of Duck Tembusu Virus
Sun Minhua,Guo Jianwei,Li Linlin,Dong Jiawen,Kuang Ruihuan,Wu Xuanguang,Zhang Jianfeng,Hu Qilin,Zhang chunhong.Establishment of an ELISA Assay for the Detection of NS1 Protein of Duck Tembusu Virus[J].Guangdong Journal of Animal and Veterinary Science,2017,42(1).
Authors:Sun Minhua  Guo Jianwei  Li Linlin  Dong Jiawen  Kuang Ruihuan  Wu Xuanguang  Zhang Jianfeng  Hu Qilin  Zhang chunhong
Abstract:
Keywords:
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