| 草莓镶脉病毒外壳蛋白抗原表位预测、克隆、表达及鉴定 |
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| 引用本文： | 杨菊梅,马建忠,潘博,李印武.草莓镶脉病毒外壳蛋白抗原表位预测、克隆、表达及鉴定[J].植物保护学报,2018,45(3):439-446. |
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| 作者姓名： | 杨菊梅 马建忠 潘博 李印武 |
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| 作者单位： | 兰州理工大学生命科学与工程学院;兰州大学第二医院;甘肃启明星节能科技有限公司 |
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| 基金项目： | 甘肃省科技计划项目（1504WKCA020），国家大学生创新创业训练项目（DC2015085），甘肃省横向科技项目（10-2203） |
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| 摘 要： | 为实现草莓镶脉病毒(Strawberry vein banding virus,SVBV)的简单和快速检测,应用生物信息学方法分析了SVBV外壳蛋白的线性抗原表位及其理化性质,以大肠杆菌的优势密码子对所预测的优势抗表原位进行设计并合成,同时进行了最佳异源表达条件优化。结果表明,第218~238位的氨基酸残基序列为SVBV外壳蛋白的优势抗原表位,其编码片段为5-AE。十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)检测结果表明,重组融合蛋白的分子量约为24.8 kD,与其理论分子量20.5 kD基本一致。异源表达优化的结果表明,当IPTG浓度为0.5 mmol/L、温度为40℃、诱导时间为4 h时,重组融合蛋白的表达量最高,为23.6 mg/L。Western blot结果表明重组融合蛋白能与His多克隆抗体起特异性反应。串联质谱结果表明,5-AE肽段氨基酸残基序列正确。
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| 关 键 词： | 草莓镶脉病毒 外壳蛋白 抗原表位 原核表达 质谱鉴定 |
| 收稿时间： | 2016/10/9 0:00:00 |
Prediction, cloning, expression and identification of an epitope of the coat protein of the Strawberry vein banding virus |
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| Yang Jumei,Ma Jianzhong,Pan Bo and Li Yinwu.Prediction, cloning, expression and identification of an epitope of the coat protein of the Strawberry vein banding virus[J].Acta Phytophylacica Sinica,2018,45(3):439-446. |
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| Authors: | Yang Jumei Ma Jianzhong Pan Bo and Li Yinwu |
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| Institution: | College of Life Science and Engineering, Lanzhou University of Technology, Lanzhou 730050, Gansu Province, China;Lanzhou University Second Hospital, Lanzhou 730030, Gansu Province, China,College of Life Science and Engineering, Lanzhou University of Technology, Lanzhou 730050, Gansu Province, China,Gansu Qimingxing Energy-Saving Limited Company, Baiyin 730913, Gansu Province, China and Gansu Qimingxing Energy-Saving Limited Company, Baiyin 730913, Gansu Province, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Strawberry vein banding virus coat protein epitope prokaryotic expression identification by mass spectrometry |
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