| 马铃薯Y病毒衣壳蛋白的表达、纯化与结晶条件筛选 |
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| 引用本文： | 蒋君梅,杜巧丽,陈美晴,严云龙,谢鑫,李向阳.马铃薯Y病毒衣壳蛋白的表达、纯化与结晶条件筛选[J].植物保护学报,2022,49(2):508-514. |
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| 作者姓名： | 蒋君梅 杜巧丽 陈美晴 严云龙 谢鑫 李向阳 |
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| 作者单位： | 贵州大学, 绿色农药与农业生物工程教育部重点实验室, 贵州大学精细化工研究开发中心, 贵阳 550025;贵州大学农学院, 农业微生物特色重点实验室, 贵阳 550025 |
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| 基金项目： | 国家重点研发计划(2021YFD1700101); 贵州省科技计划项目(黔科合支撑[2022]一般091); 国家自然科学基金(31960546) |
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| 摘 要： | 为研究马铃薯Y病毒（potato virus Y,PVY）衣壳蛋白（coat protein,CP）在体外表达及CP重组蛋白的晶体生长条件，通过Eco R Ⅰ/Hind Ⅲ酶切及连接技术构建pET-32a-PVY CP原核表达载体，对PVY CP的诱导剂浓度进行优化，利用蛋白质纯化及脱盐技术对PVY CP进行纯化和脱盐，并分析PVY CP重组蛋白的晶体生长条件。结果表明，成功构建了pET-32a-PVY CP原核表达载体；PVY CP在大肠杆菌Escherichia coli感受态细胞BL21(DE3)原核表达系统中，于16℃下利用0.8 mmol/L异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷（isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside,IPTG）诱导表达可获得高浓度的PVY CP可溶性蛋白；PVY CP重组蛋白在二水甲酸镁处理下可生长出棒状结构晶体。
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| 关 键 词： | 马铃薯Y病毒 衣壳蛋白 可溶性蛋白 表达纯化 结晶 |
| 收稿时间： | 2020/7/13 0:00:00 |
Expression and purification of potato Y virus coat protein and screening of crystallization conditions |
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| JIANG Jun-mei,DU Qiao-li,CHEN Mei-qing,YAN Yun-long,XIE Xin,LI Xiang-yang.Expression and purification of potato Y virus coat protein and screening of crystallization conditions[J].Acta Phytophylacica Sinica,2022,49(2):508-514. |
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| Authors: | JIANG Jun-mei DU Qiao-li CHEN Mei-qing YAN Yun-long XIE Xin LI Xiang-yang |
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| Institution: | Fine Chemical Research and Development Center;Key Laboratory of Agricultural Microbiology, College of Agriculture, Guizhou University, Guiyang 550025, Guizhou Province, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | potato virus Y coat protein(CP) soluble protein expression purification crystallization |
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