逆转录环介导等温扩增技术检测南方菜豆花叶病毒 |
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引用本文: | 郭立新,段维军,徐亚飞,徐颖,张永江,张吉红.逆转录环介导等温扩增技术检测南方菜豆花叶病毒[J].植物病理学报,2014,44(4):349-356. |
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作者姓名: | 郭立新 段维军 徐亚飞 徐颖 张永江 张吉红 |
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作者单位: | 1. 北仑出入境检验检疫局,宁波 315800; 2. 宁波出入境检验检疫局,宁波 315012; 3.中国检验检疫科学研究院植物检疫研究所,北京 100029 |
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基金项目: | 宁波检验检疫局科研项目(甬K07-2011); 国家质检总局科研项目(2011IK169, 2012IK297); 宁波市社会发展科研项目(2012C50041); 国家科技支撑计划(2012BAK11B02); 宁波市科研项目(2011C50080) |
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摘 要: | 根据南方菜豆花叶病毒外壳蛋白基因序列设计并合成了4组RT-LAMP引物,通过引物筛选试验,确定SB1组引物为最佳引物,并进行了引物特异性与灵敏度检测试验,最终建立了南方菜豆花叶病毒的RT-LAMP检测方法。灵敏度检测试验显示,RT-LAMP方法比普通RT-PCR法灵敏度高10倍,而检测时间明显缩短,整个反应过程只需40 min。此外,体系中加入钙黄绿素,反应结束后,可裸眼观察颜色变化来判定结果。本研究所建立的SBMV RT-LAMP方法具有快速、稳定、灵敏、特异、操作简单的特点,适合于SBMV的现场快速检测。
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关 键 词: | 南方菜豆花叶病毒 逆转录环介导等温扩增 检测 |
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