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表达dsRNA的细菌提取液可抑制黄瓜花叶病毒对烟草的侵染
引用本文:张德咏,朱春晖,成飞雪,何明远,张战泓,刘勇.表达dsRNA的细菌提取液可抑制黄瓜花叶病毒对烟草的侵染[J].植物病理学报,2008,38(3):304-311.
作者姓名:张德咏  朱春晖  成飞雪  何明远  张战泓  刘勇
作者单位:1. 湖南省植物保护研究所, 长沙 410125;2. 湖南省蔬菜研究所, 长沙 410125
摘    要: 利用RT-PCR分别克隆了CMV P3613株系的RNA2片段、MP(movement protein)基因片段及CMV AN株系的CP(coat protein)基因片段。以CP基因为中间间隔序列,分别构建了含有RNA2片段和MP基因反向重复片段的原核表达载体。体外转录试验表明:两个载体转录后都能形成预期大小的dsRNA。经过IPTG诱导,在大肠杆菌HT115(DE3)菌株中可表达产生预期大小的核酸片段,经DNase和RNaseA消化处理,证实为dsRNA。将表达病毒基因dsRNA的细菌超声破碎后处理烟草,进行保护和治疗试验,结果表明:表达CMV MP基因和RNA2片段dsRNA的细菌破碎液能够诱导烟草对CMV产生抗性。接种病毒60d后,保护效果试验病株率分别为45%和60%,治疗效果试验病株率分别为75%和85%,而其他对照发病率均为100%。本研究结果证明了利用RNA沉默的原理,构建具有反向重复序列的原核表达载体,用细菌表达dsRNA的粗提取物可防治CMV对烟草的侵染。

关 键 词:黄瓜花叶病毒  RNA沉默  双链RNA表达  细菌  保护  病毒侵染  

Crude extracts of bacterially expressed dsRNA can be used to protect tobaccos against CMV infections
ZHANG De-yong,ZHU Chan-hui,CHENG Fei-xue,HE Ming-yuan,ZHANG Zhan-hong,LIU Yong.Crude extracts of bacterially expressed dsRNA can be used to protect tobaccos against CMV infections[J].Acta Phytopathologica Sinica,2008,38(3):304-311.
Authors:ZHANG De-yong  ZHU Chan-hui  CHENG Fei-xue  HE Ming-yuan  ZHANG Zhan-hong  LIU Yong
Institution:1. Hunan Plant Protection Institute, Changsha 410125, China;2. Hunan Vegetable Institute, Changsha 410125, China
Abstract:
Keywords:Cucumber mosaic virus  RNA silencing  dsRNA expression  bacteria  protection  viralinfections  
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