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双重PCR检测马铃薯晚疫病和环腐病方法的建立
引用本文:刘秀丽,庞博,张金文,王蒂,张俊莲.双重PCR检测马铃薯晚疫病和环腐病方法的建立[J].植物保护,2015,41(2):114-119.
作者姓名:刘秀丽  庞博  张金文  王蒂  张俊莲
作者单位:1.甘肃省作物遗传改良与种质创新重点实验室, 甘肃省干旱生境作物学重点实验室, 甘肃农业大学农学院, 兰州730070; 2. 陇东学院生命科学与技术学院, 庆阳745000
基金项目:甘肃省科技重大专项(1102NKDA025); 国家自然科学基金(31260343)
摘    要:通过克隆马铃薯环腐病菌和晚疫病菌转录间隔区(ITS)序列,并对测序结果进行同源性比较,选取差异位点分别设计了两对引物P.IN1/P.IN2和C.IN1/C.IN2,并检测了引物的特异性及方法的灵敏度。引物P.IN1/P.IN2可扩增出1条363bp马铃薯晚疫病菌的特异性条带,在DNA水平上其灵敏度达18fg/μL;引物C.IN1/C.IN2可扩增出1条218bp马铃薯环腐病菌的特异性条带,在细菌数上检测灵敏度为104 cfu/mL。混合这两对引物构建双重PCR反应体系,能从马铃薯环腐病菌和晚疫病菌的混合DNA及感染这两种菌的马铃薯植株中同时扩增到363bp和218bp的特异片段。实现了同时对马铃薯晚疫病菌和环腐病菌的快速可靠检测。

关 键 词:马铃薯  双重PCR  马铃薯晚疫病菌  马铃薯环腐病菌
收稿时间:2014/2/23 0:00:00
修稿时间:2014/6/11 0:00:00

Development of duplex PCR assay for detection of Phytophthora infestans and Clavibacter michiganensis subsp.sepedonicum
Liu Xiuli,Pang Bo,Zhang Jinwen,Wang Di,Zhang Junlian.Development of duplex PCR assay for detection of Phytophthora infestans and Clavibacter michiganensis subsp.sepedonicum[J].Plant Protection,2015,41(2):114-119.
Authors:Liu Xiuli  Pang Bo  Zhang Jinwen  Wang Di  Zhang Junlian
Institution:1.Gansu Key Laboratory of Crop Improvement & Germplasm Enhancement, Gansu Provincial Key Laboratory of Aridland Crop Science, College of Agronomy, Gansu Agricultural University, Lanzhou 730070, China; 2. College of Life Science and Technology, Longdong University, Qingyang 745000, China
Abstract:
Keywords:potato  duplex PCR  Phytophthora infestans  Clavibacter michiganensis subsp  sepedonicum
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