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利用双标准曲线法检测刺萼龙葵 SrDOG1基因的表达
引用本文:王新果,赵丹丹,黄红娟,黄兆峰,陈景超,王慧敏,张朝贤,魏守辉.利用双标准曲线法检测刺萼龙葵 SrDOG1基因的表达[J].植物保护,2018,44(1):121-126.
作者姓名:王新果  赵丹丹  黄红娟  黄兆峰  陈景超  王慧敏  张朝贤  魏守辉
作者单位:中国农业科学院植物保护研究所, 北京 100193
基金项目:国家自然科学基金 (31572022, 31171867)
摘    要:双标准曲线法是基因表达定量研究中应用较广的一种相对定量检测方法。本研究结合绝对定量的原理,对传统双标准曲线法进行了改进。以刺萼龙葵延迟萌发基因DELAY OF GERMINATION 1(DOG1)的表达检测为例,选择β-actin为内参基因,分别将目的基因和内参基因片段插入pEASY-Blunt Zero载体,制作标准质粒。提取冷藏或常温储藏种子的RNA进行荧光扩增,同时将标准质粒梯度稀释液作为模板构建标准曲线,以此计算SrDOG1的相对表达量。结果表明,双标准曲线法能够灵敏地检测SrDOG1基因的差异表达,发现冷藏种子中SrDOG1基因的表达量较常温储藏显著增高。双标准曲线法检测结果稳定,重现性好,数据处理简单,适用于多种条件下基因表达水平的比较,为进一步系统研究刺萼龙葵DOG1基因的表达特性和基因功能奠定了基础。

关 键 词:双标准曲线法    刺萼龙葵    DOG1  基因    相对定量    表达检测
收稿时间:2017/4/21 0:00:00
修稿时间:2017/5/25 0:00:00

Detection of DOG1 gene expression in Solanum rostratum by double standard curve method
WANG Xinguo,ZHAO Dandan,HUANG Hongjuan,HUANG Zhaofeng,CHEN Jingchao,WANG Huimin,ZHANG Chaoxian,WEI Shouhui.Detection of DOG1 gene expression in Solanum rostratum by double standard curve method[J].Plant Protection,2018,44(1):121-126.
Authors:WANG Xinguo  ZHAO Dandan  HUANG Hongjuan  HUANG Zhaofeng  CHEN Jingchao  WANG Huimin  ZHANG Chaoxian  WEI Shouhui
Institution:Institute of Plant Protection, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Beijing 100193, China
Abstract:
Keywords:double standard curve  Solanum rostratum  DOG 1  relative quantification  expression detection
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