迟钝爱德华菌环介导等温扩增检测方法研究 |
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引用本文: | 何亚鹏,李小龙,刘鑫,张树林,杜迎春,李博,魏凯,邹强军.迟钝爱德华菌环介导等温扩增检测方法研究[J].水产养殖,2023(1):24-27+36. |
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作者姓名: | 何亚鹏 李小龙 刘鑫 张树林 杜迎春 李博 魏凯 邹强军 |
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作者单位: | 北京市水生野生动植物救护中心 |
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摘 要: | 为了建立一套用于实验室及室外现场检测迟钝爱德华菌(Edwardsiella tarda, Et)的环介导等温扩增方法(loop-mediated isothermal amplification, LAMP),以迟钝爱德华菌的毒力基因fimA为靶基因设计特异性引物,以基因组DNA为模板,进行环介导恒温扩增,并对其特异性、灵敏性和临床检测进行了试验。结果显示,迟钝爱德华菌阳性样本反应呈现为荧光绿色,阴性样本不变色。该LAMP方法的最适反应温度为63℃;特异性试验表明仅迟钝爱德华菌样本发生反应,而杀鲑气单胞菌、嗜水气单胞菌、温气单胞菌和豚鼠气单胞菌均不发生反应;敏感性试验表明,该LAMP方法可检出浓度为2.16×10-5mg/L的迟钝爱德华菌的核酸。
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关 键 词: | 迟钝爱德华菌 环介导等温扩增 fimA基因 |
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