| 奥利亚罗非鱼卵巢芳香化酶基因的克隆及其表达 |
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| 引用本文： | 唐永凯,李建林,陈文华,俞菊华.奥利亚罗非鱼卵巢芳香化酶基因的克隆及其表达[J].中国水产科学,2008,15(5). |
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| 作者姓名： | 唐永凯 李建林 陈文华 俞菊华 |
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| 作者单位： | 1. 中国水产科学研究院淡水渔业研究中心,农业部水生动物遗传育种和养殖生物学重点开放实验室,江苏,无锡,214081
2. 上海海洋大学,生命科学与技术学院,上海,200090 |
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| 基金项目： | 江苏省自然科学基金，江苏省自然科学基金 |
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| 摘 要： | 采用RT-PCR和快速扩增cDNA末端(Rapid amplification of cDNA ends,RACE)法分离出奥利亚罗非鱼(Oreochromis aureus)卵巢芳香化酶(P450aromA)的全序列,得到1784bp的全长eDNA,包括38bp5'非翻译区,1566 bp阅读框以及含Poly(A)信号(AATAAA)的167bp3'非翻译区不包括Poly(A)].阅读框共编码521个氨基酸,推算的蛋白质分子量为59kD.同源性分析显示,奥利亚罗非鱼P450aromA的氨基酸序列与其他鱼类性腺芳香化酶(P450arom)具有70%以上的同源性,与其他鱼类脑P450arom有60%左右同源性,但其芳香化酶高保守区包括I-螺旋区、芳香化酶特异保守区和血红素结合区分别与其他鱼类P450arom的同源性高达83%～96%、78%~86%和85% ～100%.系统发育分析表明,奥利亚罗非鱼P450aromA属于鱼类性腺P450arom,分子系统进化树分析结果与根据传统的形态学和生化特征分类结果基本一致.生物信息学分析显示,奥利亚罗非鱼P450aromA基因编码的蛋白无信号肽,无跨膜区域,为非分泌型蛋白.同时还含有多个酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化位点、N-糖基激化位点、N-肉豆蔻酰化位点及蛋白激酶C磷酸化位点.使用Taqman探针法检测P450aromA在奥利亚罗非鱼咸鱼各种组织中的表达.结果发现,P450aromA只在卵巢中表达.同时比较了鱼苗、鱼种和成鱼卵巢中P450aromA的表达差异,结果显示,鱼苗中无P450aromA的表达,成鱼中P450aromA的表达量是鱼种阶段的30倍.
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| 关 键 词： | 奥利亚罗非鱼 芳香化酶 Taqman探针 |
| 修稿时间： | 2010/4/8 0:00:00 |
Cloning and expression of P450arom from Oreochromis aureus ovary |
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| TANG Yong-kai,LI Jian-lin,CHEN Wen-hua,YU Ju-hua.Cloning and expression of P450arom from Oreochromis aureus ovary[J].Journal of Fishery Sciences of China,2008,15(5). |
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| Authors: | TANG Yong-kai LI Jian-lin CHEN Wen-hua YU Ju-hua |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | RACE |
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