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刺激隐核虫小GTP酶Ran基因的克隆与表达
引用本文:付国良,黄玛娇,谢金珠,胡燕红,晏燕花,黄镇,黄晓红.刺激隐核虫小GTP酶Ran基因的克隆与表达[J].中国水产科学,2016,23(3):672-681.
作者姓名:付国良  黄玛娇  谢金珠  胡燕红  晏燕花  黄镇  黄晓红
作者单位:1. 福建师范大学生命科学学院,福建省发育与神经生物学重点实验室,福建福州 350117; 江西省东乡县第一中学,江西东乡331800;2. 福建师范大学生命科学学院,福建省发育与神经生物学重点实验室,福建福州 350117
基金项目:福建省教育厅 JK 项目(JK2013008),福建省自然科学基金项目(2014J01120),福建省公务员局引进人才科研启动项目(2010-595),福建省农业重大专项(2013NZ0002-5)
摘    要:对刺激隐核虫(Cryptocaryon irritans)的小GTP酶Ran基因(Ci Ran)进行研究,以期为刺激隐核虫病原生物学研究及其防治提供理论基础。从刺激隐核虫滋养体/包囊前期cDNA文库中筛选出Ci Ran基因的克隆,利用生物信息学方法对CiRan基因及其编码的蛋白进行结构与功能的预测;通过逆转录PCR检测CiRan的mRNA。结果表明其在刺激隐核虫的各个发育阶段均有表达。对CiRan基因开放阅读框内的非通用密码子进行改造,并构建重组质粒p GEX-4T-1/CiRan,将其转化到大肠杆菌(E.coli)后成功表达分子量为51.3 kD的重组融合蛋白rCiRan。用rCiRan蛋白免疫鼠血清进行免疫印迹分析,结果表明,抗rCiRan血清能识别刺激隐核虫各期虫体的天然CiRan蛋白,其表观分子量为25.3 kD,与根据编码基因序列推测出的理论值相符;以rCiRan的抗血清做间接免疫荧光抗体实验,结果表明天然CiRan蛋白在幼虫的细胞质和细胞核内均有分布,且在核膜周围富集,佐证了该分子潜在的功能。

关 键 词:刺激隐核虫  小GTP酶Ran  克隆  表达  分析
修稿时间:2016/5/18 0:00:00

Cloning and expression of a Ran-like small GTPase gene from Cryptocaryon irritans
FU Guoliang,HUANG Majiao,XIE Jinzhu,HU Yanhong,YAN Yanhu,HUANG Zhen,HUANG Xiaohong.Cloning and expression of a Ran-like small GTPase gene from Cryptocaryon irritans[J].Journal of Fishery Sciences of China,2016,23(3):672-681.
Authors:FU Guoliang  HUANG Majiao  XIE Jinzhu  HU Yanhong  YAN Yanhu  HUANG Zhen  HUANG Xiaohong
Institution:1. Fujian Key Laboratory of Developmental and Neural Biology, College of Life Science, Fujian Normal University, Fuzhou 350117, China;2. The First Middle School, Dongxiang County, Dongxiang 331800, China
Abstract:
Keywords:Cryptocaryon irritans  Ras-related nuclear protein  cloning  expression  analysis
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