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鲤春病毒血症病毒糖蛋白的截短表达及其免疫原性分析
引用本文:徐进,周勇,陈倩,曾令兵.鲤春病毒血症病毒糖蛋白的截短表达及其免疫原性分析[J].中国水产科学,2016,23(2):352-358.
作者姓名:徐进  周勇  陈倩  曾令兵
作者单位:中国水产科学研究院长江水产研究所,湖北武汉,430223
基金项目:现代农业产业技术体系建设专项资金资助项目(CARS-46-11)
摘    要:为了揭示鲤春病毒血症病毒(spring viremia of carp virus,SVCV)糖蛋白编码基因的主要免疫原性决定区域,本研究对SVCV的糖蛋白基因进行截短表达,并用纯化的重组蛋白作为免疫原制备了兔抗血清以分析其免疫原性。通过SOSUI以及DNAStar 6.0软件对SVCV糖蛋白基因的跨膜区、亲水性以及抗原表位进行分析后,采用RT-PCR对该基因主要抗原决定区域编码片段进行扩增,并构建重组表达质粒p GEX-Gtr,对其进行诱导表达后获得截短的SVCV糖蛋白的重组蛋白。将表达的重组蛋白进行纯化复性后,作为免疫原制备兔抗血清,采用ELISA法检测其效价,采用免疫印迹以及间接免疫荧光技术检测该重组蛋白的免疫原性。研究结果显示,截短表达的糖蛋白编码基因长1317 bp,编码439个氨基酸(29~467),推测分子量为49.6 k D。利用该重组蛋白制备的兔抗血清,其与重组蛋白的反应效价为1∶64000,。免疫印迹及间接免疫荧光结果显示,该兔抗血清与SVCV-HN株能发生特异性反应,表明该重组蛋白与天然的病毒表面糖蛋白的免疫原性无差异。上述研究结果表明,截短表达的重组蛋白具有很好的免疫原性,可应用于免疫诊断技术研发与基因工程疫苗的研制。

关 键 词:鲤春病毒血症病毒  糖蛋白编码基因  克隆  蛋白截短表达  免疫原性
修稿时间:2016/3/14 0:00:00

Expression and immunogenicity analysis of a truncated glycoprotein of spring viremia of carp virus (SVCV)
XU Jin,ZHOU Yong,CHEN Qian,ZENG Lingbing.Expression and immunogenicity analysis of a truncated glycoprotein of spring viremia of carp virus (SVCV)[J].Journal of Fishery Sciences of China,2016,23(2):352-358.
Authors:XU Jin  ZHOU Yong  CHEN Qian  ZENG Lingbing
Institution:Yangtze River Fisheries Research Institute, Chinese Academy of Fishery Sciences, Wuhan 430223, China
Abstract:
Keywords:spring viremia of carp virus (SVCV)  glycoprotein encoding gene  cloning  truncated expression  immu-nogenicity
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