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半滑舌鳎CD40基因克隆及其免疫功能分析
引用本文:位战飞,郭华,李海龙,郑卫卫,王文文,戴欢,朱颖,刘洋,董忠典,陈松林.半滑舌鳎CD40基因克隆及其免疫功能分析[J].中国水产科学,2016,23(5):1063-1072.
作者姓名:位战飞  郭华  李海龙  郑卫卫  王文文  戴欢  朱颖  刘洋  董忠典  陈松林
作者单位:1. 中国水产科学研究院黄海水产研究所,农业部海洋与渔业资源重点实验室,山东青岛266071;上海海洋大学水产与生命学院,上海201306;2. 中国水产科学研究院黄海水产研究所,农业部海洋与渔业资源重点实验室,山东青岛266071
基金项目:国家自然科学基金重点项目(31530078),山东省泰山学者攀登计划专项资助项目
摘    要:本研究通过RACE技术在半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)中克隆得到1个CD40同源基因。该基因c DNA全长为2098 bp,开放阅读框为1011 bp,可编码由336个氨基酸组成的蛋白质。推导得到的CD40氨基酸序列包含1个信号肽、1个跨膜结构区、2个N-糖基化位点以及含4个富含半胱氨酸的保守结构区。不同物种氨基酸序列同源分析结果显示,该基因与哺乳类、两栖类以及硬骨鱼类相似性为28%~47%,其中与硬骨鱼类相似性较高。系统进化分析结果显示,半滑舌鳎CD40与其他硬骨鱼类CD40聚类为一支,哺乳类与两栖类CD40聚类为另一支。荧光定量PCR结果显示,CD40在健康半滑舌鳎不同组织中均有表达,其中在鳃、肝和脾等组织中表达量较高,在肠、肌肉和皮肤中表达量较低,在脑和肾中微量表达。经哈维氏弧菌(Vibrio harveyi)感染刺激后,与PBS处理的对照组相比,该基因m RNA在半滑舌鳎3个主要免疫组织(肝、脾和肾)中表达量均呈显著性升高,在肝中12 h到达峰值,在脾和肾中6 h达到峰值。上述结果表明CD40基因参与了半滑舌鳎抵抗哈维氏弧菌的免疫应答反应。

关 键 词:半滑舌鳎  CD40基因  克隆  荧光定量  哈维氏弧菌
修稿时间:2016/9/5 0:00:00

Cloning and immunologic function analysis of CD40 from half-smooth tongue sole (Cynoglossus semilaevis)
WEI Zhanfei,GUO Hu,LI Hailong,ZHENG Weiwei,WANG Wenwen,DAI Huan,ZHU Ying,LIU Yang,DONG Zhongdian,CHEN Songlin.Cloning and immunologic function analysis of CD40 from half-smooth tongue sole (Cynoglossus semilaevis)[J].Journal of Fishery Sciences of China,2016,23(5):1063-1072.
Authors:WEI Zhanfei  GUO Hu  LI Hailong  ZHENG Weiwei  WANG Wenwen  DAI Huan  ZHU Ying  LIU Yang  DONG Zhongdian  CHEN Songlin
Institution:1. Key Laboratory for Sustainable Development of Marine Fisheries, Ministry of Agriculture;Yellow Sea Fisheries Re-search Institute, Chinese Academy of Fisheries Sciences, Qingdao 266071, China;2. College of Fisheries and Life Sciences, Shanghai Ocean
Abstract:
Keywords:Cynoglossus semilaevis  CD40 gene  gene clone  real-time quantitative PCR  Vibrio harveyi
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