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PCR法制备地高辛标记DNA探针斑点杂交检测对虾传染性皮下及造血组织坏死病毒(IHHNV)
引用本文:杨冰,黄倢,宋晓玲,史成银,刘莉,刘庆慧.PCR法制备地高辛标记DNA探针斑点杂交检测对虾传染性皮下及造血组织坏死病毒(IHHNV)[J].中国水产科学,2004,11(2):95-98.
作者姓名:杨冰  黄倢  宋晓玲  史成银  刘莉  刘庆慧
作者单位:中国水产科学研究院,黄海水产研究所,山东,青岛,266071
基金项目:国家"973"重点基础研究项目(G1999012002)资助;青岛市科技发展计划项目(02-2-kj-hh-74)资助.
摘    要:利用非放射性标记物地高辛(DIG),通过PCR方法制备了对虾传染性皮下及造血组织坏死病毒(IHHNV)DNA探针,探针长度705bp,标记产量为20ng/μL。通过核酸探针斑点杂交检测方法对此探针特异性及灵敏度进行验证,结果表明,该探针具有较高的灵敏度和较强的特异性,检测IHHNV DNA的检出灵敏度为24.8pg,可检出26.6ng患病对虾组织DNA中的IHHNV,与250.4ng健康虾组织DNA、202.5ng健康虾匀浆液,白斑综合症病毒(WSSV)DNA和肝胰腺细小病毒(HPV)DNA均不发生交叉反应。本方法可应用于健康亲虾、苗种的培育和无特定病原(SPF)对虾种群的选育及IHHNV流行病学调查,并具有较高的应用价值。

关 键 词:传染性皮下及造血组织坏死病毒(IHHNV)  PCR  探针  斑点杂交
文章编号:1005-8737-(2004)02-0095-04
修稿时间:2003年9月3日

Detection of IHHNV in shrimp by dot blot hybridization with digoxigenin labeled DNA probe by PCR
Abstract:
Keywords:IHHNV  PCR  probe  dot blot hybridization
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