PCR法制备地高辛标记DNA探针斑点杂交检测对虾传染性皮下及造血组织坏死病毒(IHHNV) |
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引用本文: | 杨冰,黄倢,宋晓玲,史成银,刘莉,刘庆慧.PCR法制备地高辛标记DNA探针斑点杂交检测对虾传染性皮下及造血组织坏死病毒(IHHNV)[J].中国水产科学,2004,11(2):95-98. |
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作者姓名: | 杨冰 黄倢 宋晓玲 史成银 刘莉 刘庆慧 |
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作者单位: | 中国水产科学研究院,黄海水产研究所,山东,青岛,266071 |
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基金项目: | 国家"973"重点基础研究项目(G1999012002)资助;青岛市科技发展计划项目(02-2-kj-hh-74)资助. |
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摘 要: | 利用非放射性标记物地高辛(DIG),通过PCR方法制备了对虾传染性皮下及造血组织坏死病毒(IHHNV)DNA探针,探针长度705bp,标记产量为20ng/μL。通过核酸探针斑点杂交检测方法对此探针特异性及灵敏度进行验证,结果表明,该探针具有较高的灵敏度和较强的特异性,检测IHHNV DNA的检出灵敏度为24.8pg,可检出26.6ng患病对虾组织DNA中的IHHNV,与250.4ng健康虾组织DNA、202.5ng健康虾匀浆液,白斑综合症病毒(WSSV)DNA和肝胰腺细小病毒(HPV)DNA均不发生交叉反应。本方法可应用于健康亲虾、苗种的培育和无特定病原(SPF)对虾种群的选育及IHHNV流行病学调查,并具有较高的应用价值。
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关 键 词: | 传染性皮下及造血组织坏死病毒(IHHNV) PCR 探针 斑点杂交 |
文章编号: | 1005-8737-(2004)02-0095-04 |
修稿时间: | 2003年9月3日 |
Detection of IHHNV in shrimp by dot blot hybridization with digoxigenin labeled DNA probe by PCR |
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Abstract: | |
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Keywords: | IHHNV PCR probe dot blot hybridization |
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