草鱼Mx蛋白基因的克隆与原核表达 |
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引用本文: | 王伟,白俊杰,劳海华,叶星,罗建仁.草鱼Mx蛋白基因的克隆与原核表达[J].中国水产科学,2003,10(5):365-369. |
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作者姓名: | 王伟 白俊杰 劳海华 叶星 罗建仁 |
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作者单位: | 1. 中国水产科学研究院,珠江水产研究所,中国水产科学研究院,热带亚热带鱼类选育与养殖重点开放实验室,广东,广州,510380;上海水产大学,上海,200090 2. 中国水产科学研究院,珠江水产研究所,中国水产科学研究院,热带亚热带鱼类选育与养殖重点开放实验室,广东,广州,510380 |
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基金项目: | 中国水产科学研究院基金项目 (99-0 8-0 3 ) |
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摘 要: | 根据已报道的Mx蛋白cDNA序列设计合成特异引物,应用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法,从草鱼呼肠孤病毒(GCRV)诱导的草鱼(Ctenopharyngodon idellus)肝脏总RNA中扩增获得Mx蛋白cDNA,回收纯化后克隆到pGEM-T Easy Vector系统的T载体上。重组子的序列分析表明:所克隆的Mx蛋白cDNA长722bp,编码240个氨基酸,包括1个三联GTP结合区域和1个发动蛋白(dynamin)族特征的序列。与已知鱼类Mx蛋白基因序列比较表明,草鱼Mx蛋白基因序列与其它鱼类Mx基因相应序列具有较高的同源性,其中与斑马鱼Mx蛋白E型基因碱基序列比较同源性最高,为87.1%。将此基因改造后定向克隆至原核表达质粒pBV220,构建成重组草鱼Mx蛋白基因表达质粒pBVgcMx,并在大肠杆菌中获得高效表达,重组草鱼Mx蛋白的表达量占菌体总蛋白的26.6%。Q-sephrose FF层析柱分离纯化的重组草鱼Mx蛋白纯度达95.6%。
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关 键 词: | 草鱼 Mx蛋白基因 克隆 原核表达 测序分析 纯化 氨基酸 |
文章编号: | 1005-8737-(2003)05-0365-05 |
修稿时间: | 2003年4月11日 |
Cloning of cDNA for grass carp Mx protein and its expression in prokaryocyte |
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Abstract: | |
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Keywords: | grass carp Mx protein gene gene clone prokaryotic expression |
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