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草鱼Mx蛋白基因的克隆与原核表达
引用本文:王伟,白俊杰,劳海华,叶星,罗建仁.草鱼Mx蛋白基因的克隆与原核表达[J].中国水产科学,2003,10(5):365-369.
作者姓名:王伟  白俊杰  劳海华  叶星  罗建仁
作者单位:1. 中国水产科学研究院,珠江水产研究所,中国水产科学研究院,热带亚热带鱼类选育与养殖重点开放实验室,广东,广州,510380;上海水产大学,上海,200090
2. 中国水产科学研究院,珠江水产研究所,中国水产科学研究院,热带亚热带鱼类选育与养殖重点开放实验室,广东,广州,510380
基金项目:中国水产科学研究院基金项目 (99-0 8-0 3 )
摘    要:根据已报道的Mx蛋白cDNA序列设计合成特异引物,应用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法,从草鱼呼肠孤病毒(GCRV)诱导的草鱼(Ctenopharyngodon idellus)肝脏总RNA中扩增获得Mx蛋白cDNA,回收纯化后克隆到pGEM-T Easy Vector系统的T载体上。重组子的序列分析表明:所克隆的Mx蛋白cDNA长722bp,编码240个氨基酸,包括1个三联GTP结合区域和1个发动蛋白(dynamin)族特征的序列。与已知鱼类Mx蛋白基因序列比较表明,草鱼Mx蛋白基因序列与其它鱼类Mx基因相应序列具有较高的同源性,其中与斑马鱼Mx蛋白E型基因碱基序列比较同源性最高,为87.1%。将此基因改造后定向克隆至原核表达质粒pBV220,构建成重组草鱼Mx蛋白基因表达质粒pBVgcMx,并在大肠杆菌中获得高效表达,重组草鱼Mx蛋白的表达量占菌体总蛋白的26.6%。Q-sephrose FF层析柱分离纯化的重组草鱼Mx蛋白纯度达95.6%。

关 键 词:草鱼  Mx蛋白基因  克隆  原核表达  测序分析  纯化  氨基酸
文章编号:1005-8737-(2003)05-0365-05
修稿时间:2003年4月11日

Cloning of cDNA for grass carp Mx protein and its expression in prokaryocyte
Abstract:
Keywords:grass carp  Mx protein gene  gene clone  prokaryotic expression
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