| 草鱼肾细胞中细胞色素P450 3A基因诱导表达及其酶活性分析 |
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| 引用本文： | 符贵红,杨先乐,喻文娟,胡鲲,章海鑫,黄宣运.草鱼肾细胞中细胞色素P450 3A基因诱导表达及其酶活性分析[J].中国水产科学,2011,18(4):720-727. |
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| 作者姓名： | 符贵红 杨先乐 喻文娟 胡鲲 章海鑫 黄宣运 |
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| 作者单位： | 1. 上海海洋大学水产与生命学院,农业部渔业动植物病原库,上海 201306
2. 中国水产科学研究院东海水产研究所,农业部水产品质量监督检验测试中心,上海 200090 |
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| 基金项目： | 国家公益性行业专项，农业部行业专项 |
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| 摘 要： | 采用基因克隆技术获取草鱼(Ctenopharyngodon idellus)细胞色素P450 3A(CYP3A)cDNA序列长1 849 bp,包含完整开放阅读框(open reading frame,ORF)1 542 bp,1个终止密码和含polyA信号3'UTR； ORF编码514个氨基酸,含信号肽(29 aa),2个跨膜螺旋区(23 aa,23 aa),血红素结合域(21 aa)和6个底物识别位点(SRSl-6)；与其他脊椎动物CYP3A氨基酸序列相似度达60％ ～ 92％.用实时定量PCR和分光光度计法分别研究了草鱼肾细胞系(Ctenopharyngodon idellus kidney cell line CIK)中利福平(rifampicin,RIF)诱导CYP3A基因表达和红霉素-N-脱甲基酶(ERND)活性,采用红霉素脱甲基酶活性法测定CYP3A的活性.结果显示,诱导组CIK细胞中CYP3A mRNA表达量在8最高,而CYP3A酶活在10h最高；CYP3A mRNA和酶活性与对照组均具显著差异性（P<0.05）.CYP3A转录水平先于相应酶活变化表达,且转录水平表达显著高于酶活性,这很可能反映了RIF对CYP3A的诱导主要作用于转录水平而不直接作用于酶活,本研究旨为药物对CYP3A转录调控和活性调节提供科学依据,并为渔药代谢酶的研究提供理论依据.
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| 关 键 词： | 细胞色素P4503A 肾细胞 草鱼 CYP3A基因和酶活性 诱导表达 利福平 |
| 修稿时间： | 2011/8/16 0:00:00 |
Induction of CYP3A gene and enzyme activity expression in kidney cell of grass carp (Ctenopharyngodon idellus) |
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| FU Guihong,YANG Xianle,YU Wenjuan,HU Kun,ZHANG Haixin,HUANG Xuanyun.Induction of CYP3A gene and enzyme activity expression in kidney cell of grass carp (Ctenopharyngodon idellus)[J].Journal of Fishery Sciences of China,2011,18(4):720-727. |
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| Authors: | FU Guihong YANG Xianle YU Wenjuan HU Kun ZHANG Haixin HUANG Xuanyun |
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| Institution: | FU Guihong1,YANG Xianle1,YU Wenjuan1,HU Kun1,ZHANG Haixin1,HUANG Xuanyun2 1.College of Fisheries and Life Science,Shanghai Ocean University,State Collection Centre of Aquatic Pathogen,Shanghai 201306,China,2.Laboratory of Fishery Environments and Aquatic Products Processing,East China Sea Fisheries Research Institute Chinese Academy of Fishery Sciences,Shanghai 200090 |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | cytochrome P450 kidney cell Chinese idle(CIK) CYP3A rifampicin RIF |
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