斑点叉尾鮰肾脏组织细胞系的建立及其生物学特性

采用组织块移植培养技术，对来源于斑点叉尾鮰（lctalurus punctatus Rafinesque）肾脏组织的细胞进行原代培养，建立了斑点叉尾鮰肾脏组织细胞系，定名为CCK，目前已稳定传代培养70多次。斑点叉尾鮰肾脏组织细胞为成纤维样细胞，最佳培养基为M199，最适培养温度范围为28～32℃，培养基血清体积分数为10％。在此条件下，CCK细胞的倍增时间为38．9～41．0h。斑点叉尾鮰肾脏细胞的集落形成效率为（74．16±3．54）%，第9代传代细胞的染色体数目为正常二倍体2n=58，第33代传代细胞的染色体众数为60。液氮冷冻保存6个月后复苏的细胞经台盼兰染色检验，（86．69±1．04）％的细胞仍保持活性，细胞复苏后培养生长旺盛。通过对第17代离体培养细胞的28S rRNA基因进行PCR扩增及序列分析与比对，表明该细胞系来源于斑点又尾鮰。