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圆口铜鱼精子超低温冷冻保存
引用本文:刘光霞,吴兴兵,何勇凤,邓智明,杨德国,王小明,杨少荣,刘欢.圆口铜鱼精子超低温冷冻保存[J].中国水产科学,2020,27(1):44-52.
作者姓名:刘光霞  吴兴兵  何勇凤  邓智明  杨德国  王小明  杨少荣  刘欢
作者单位:1. 中国水产科学研究院长江水产研究所, 农业农村部淡水生物多样性保护重点实验室, 湖北 武汉 430223;2. 上海海洋大学, 水产科学国家级实验教学示范中心, 上海 201306;3. 中国三峡建设管理有限公司, 四川 成都 610041
基金项目:现代农业产业技术体系专项资金资助项目(CARS-46);中国长江三峡集团公司科研专项(JGJ0252013).
摘    要:为建立圆口铜鱼(Coreius guichenoti)精子超低温冷冻保存方法,采用计算机辅助精子分析系统(CASA)评价了4种稀释液(D15、D20、L1、D1), 3种抗冻保护剂二甲基甲酰胺(DMF)、二甲基亚砜(DMSO)、甲醇(METH)]在3种体积浓度(7.5%、10%、12.5%, V/V)下对圆口铜鱼精液的冷冻保存效果,并比较了150 mOsm/kg NaCl与超纯水作为激活剂对精子活力的影响。结果表明,D1组稀释液的精子活率(MOT)最高,为(74.64±13.17)%,与鲜精无显著差异(P0.05);以10%甲醇作为抗冻保护剂的圆口铜鱼精子经超纯水激活后,测得MOT最高,达到(78.11±14.74)%,与鲜精无显著差异(P0.05),精子运动速度达最大,平均曲线运动速度(VCL)、平均直线运动速度(VSL)、VAP(平均路径运动速度)分别达到(50.28±12.46)μm/s、(35.06±10.82)μm/s、(39.44±12.46)μm/s,精子快速运动时间和寿命分别为(8.67±1.15) s、(33.33±5.00) s,显著低于鲜精(P0.05); 7.5%甲醇组和7.5%二甲基甲酰胺组的MOT次之,分别为(77.71±17.74)%、(76.42±12.49)%,抗冻剂二甲基亚砜组的MOT显著低于甲醇组、二甲基甲酰胺组(P0.05)。12.5%的3种抗冻保护剂中,几乎无精子存活;在不同种类不同浓度的抗冻剂保护下,10%甲醇组,相较于使用超纯水激活,用150 mOsm/kg NaCl激活后的精子活率和寿命更高,说明Na~+有延长冻精寿命,提高精子活率的作用。研究表明, D1+10%METH (7.8 g/L NaCl+0.5 g/L KCl+15 g/L葡萄糖+10%METH)可用于圆口铜鱼精液超低温冷冻保存,为圆口铜鱼的繁育工作和种质资源保护奠定了基础。

关 键 词:圆口铜鱼  精子  超低温冷冻保存  稀释液  抗冻剂
修稿时间:2020/1/9 0:00:00

Cryopreservation and its effects on spermatozoa quality of Coreius guichenoti
LIU Guangxi,WU Xingbing,HE Yongfeng,DENG Zhiming,YANG Deguo,WANG Xiaoming,YANG Shaorong,LIU Huan.Cryopreservation and its effects on spermatozoa quality of Coreius guichenoti[J].Journal of Fishery Sciences of China,2020,27(1):44-52.
Authors:LIU Guangxi  WU Xingbing  HE Yongfeng  DENG Zhiming  YANG Deguo  WANG Xiaoming  YANG Shaorong  LIU Huan
Institution:1. Key Laboratory of Freshwater Biodiversity Conservation, Ministry of Agriculture and Rural Affairs;Yangtze River Fisheries Research Institute, Chinese Academy of Fishery Sciences, Wuhan 430223, China;2. National Demonstration Center for Experimental Fisheries Science Education, Shanghai Ocean University, Shanghai 201306, China;3. China Three Gorges Projects Development Co., Ltd, Chengdu 610041, China
Abstract:
Keywords:Coreius guichenoti  sperm  cryopreservation  extender  cryoprotectant
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