| 青虾血蓝蛋白基因的克隆、表达分析及多克隆抗体的制备 |
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| 引用本文： | 孙盛明,戈贤平,傅洪拓,朱健,张世勇,乔慧.青虾血蓝蛋白基因的克隆、表达分析及多克隆抗体的制备[J].中国水产科学,2014,21(2):235-243. |
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| 作者姓名： | 孙盛明 戈贤平 傅洪拓 朱健 张世勇 乔慧 |
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| 作者单位： | 1. 中国水产科学研究院 淡水渔业研究中心, 农业部淡水渔业与种质资源利用重点实验室, 江苏 无锡 214081; 2. 南京农业大学 无锡渔业学院, 江苏 无锡 214081 |
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| 基金项目： | 国家科技支撑计划项目(2012BAD26B04; 2012BAD25B07). |
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| 摘 要： | 应用RACE技术克隆了青虾(Macrobrachium nipponense)的Hc基因全长cDNA序列, 并对该基因序列特征进行了分析。青虾Hc基因cDNA全长2 235 bp, 包括10 bp的5′末端非翻译区(UTR), 2 074 bp的开放阅读框(ORF), 151 bp的3′UTR, 开放阅读框编码688个氨基酸。蛋白相似度比对显示, 青虾血蓝蛋白含有典型的6个保守的铜离子结合位点。系统进化树分析表明, 青虾Hc与脊尾白虾(Exopalaemon carinicauda) Hc聚在一起, 具有最近的亲缘关系。荧光定量PCR检测显示, Hc基因在青虾不同组织中均有表达, 其表达量在肝胰腺中最高; 使用荧光定量PCR检测青虾Hc基因在低氧胁迫和复氧条件下在肝胰腺中的mRNA时空表达情况, 结果显示, 经低氧和复氧刺激后, 与对照组相比, Hc 在肝胰腺中的表达量分别在低氧胁迫 12 h、24 h 和复氧6 h出现了3次明显上调, 由此推测Hc基因参与低氧应激分子过程。此外, 本研究通过血蓝蛋白的分离纯化技术制备了多克隆抗体, 本研究结果可为更进一步的了解青虾血蓝蛋白的生理功能提供理论支撑。
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| 关 键 词： | 青虾 血蓝蛋白 基因克隆 低氧胁迫 复氧刺激 多克隆抗体 |
| 修稿时间： | 2015/7/16 0:00:00 |
Molecular cloning and expression analysis of the hemocyanin gene from oriental river prawn (Macrobrachium nipponense) |
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| SUN Shengming,GE Xianping,FU Hongtuo,ZHU Jian,ZHANG Shiyong,QIAO Hui.Molecular cloning and expression analysis of the hemocyanin gene from oriental river prawn (Macrobrachium nipponense)[J].Journal of Fishery Sciences of China,2014,21(2):235-243. |
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| Authors: | SUN Shengming GE Xianping FU Hongtuo ZHU Jian ZHANG Shiyong QIAO Hui |
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| Institution: | 1. Key Laboratory of Freshwater Fisheries and Germplasm Resources Utilization, Ministry of Agriculture, Freshwater Fisheries Research Center, Chinese Academy of Fishery Sciences, Wuxi 214081, China; |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Macrobrachium nipponense hemocyanin gene cloning hypoxia reoxygenation polyclone antibody |
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