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鲤脑组织cDNA文库的构建及脑室管膜素基因鉴定
引用本文:李言,何薇,丁雷,李勇,梁利群,雷清泉.鲤脑组织cDNA文库的构建及脑室管膜素基因鉴定[J].中国水产科学,2009,2(2).
作者姓名:李言  何薇  丁雷  李勇  梁利群  雷清泉
作者单位:1. 大连水产学院生命科学与技术学院,辽宁,大连,110623
2. 哈尔滨理工大学,黑龙江哈尔滨150001;黑龙江水产研究所,农业部北方鱼类基因工程育种实验窒,黑龙江,哈尔滨,150070
3. 哈尔滨理工大学,黑龙江哈尔滨,150001
基金项目:国家重点基础研究发展规划(973计划) 
摘    要:用Gubler-Hoffman法构建了低温下鲤(Cyprinus carpio Linnaeus)脑组织cDNA文库,经测定库容量为5.7×105 CFU/mL,文库的重组率接近95%,平均插入片段长度约为1.5 kb,符合文库保存和筛选实验的要求.同时,根据鲤与低温相关消减cDNA文库中低温下特异表达基因片段序列,设计PCR引物在此cDNA文库中进行PCR检测和序列测定,使用BLAST软件将测序的10个cDNA序列同GenBank等数据库进行比对,结果显示8个阳性克隆有相关同源性,2个克隆为功能未知的基因,全长率近75%;以上结果说明本实验所构建的cDNA文库质量较高,可作为筛选与鲤低温性状相关的功能基因的重要资源.同时对其中一个与低温相关的基因脑室管膜素基因构建了表达载体,为进一步验证该基因在鱼类低温适应中所发挥的作用及其作用机理奠定了基础.

关 键 词:    cDNA文库  低温适应  脑室管膜素

Construction and identification of cDNA library from common carp(Cyprinus carpio Linnaeus) brain
LI Yan,HE Wei,DING Lei,LI Yong,LIANG Li-qun,LEI Qing-quan.Construction and identification of cDNA library from common carp(Cyprinus carpio Linnaeus) brain[J].Journal of Fishery Sciences of China,2009,2(2).
Authors:LI Yan  HE Wei  DING Lei  LI Yong  LIANG Li-qun  LEI Qing-quan
Abstract:
Keywords:
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