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凡纳滨对虾热休克蛋白70的原核高效表达
引用本文:吴任,谢数涛,孙勇,完颜小青,张其中.凡纳滨对虾热休克蛋白70的原核高效表达[J].中国水产科学,2006,13(2):305-309.
作者姓名:吴任  谢数涛  孙勇  完颜小青  张其中
作者单位:暨南大学,水生生物研究所,广东,广州,510632
基金项目:广东省博士启动基金;暨南大学校科研和教改项目
摘    要:将凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)热休克蛋白70基因(heat shock protein 70,HSP70)克隆到原核表达载体pET-3c中,经酶切和DNA测序鉴定后,将重组质粒转入表达宿主BL21(DE3),在不同温度、时间下经IPTG诱导表达。收集菌液,进行SDS-PAGE和Western blot检测,并用软件Bandscan分析蛋白表达水平。结果表明,成功构建含凡纳滨对虾HSP70基因的重组表达载体pET-3c/HSP70,表达的目标蛋白相对分子量约为72kD,并能与小鼠抗人HSP70抗体特异性结合。37℃诱导5h目标蛋白表达量最高;但25℃诱导目标蛋白的可溶性比例达80%,目标蛋白占全菌总蛋白70%以上,均较37℃为高。

关 键 词:凡纳滨对虾  热休克蛋白70  原核表达
文章编号:1005-8737-(2006)02-0305-05
收稿时间:2005-07-04
修稿时间:2005-09-09

High level prokaryotic expression of heat shock protein 70 in Litopenaeus vannamei
WU Ren,XIE Shu-tao,SUN Yong,WANYAN Xiao-qing,ZHANG Qi-zhong.High level prokaryotic expression of heat shock protein 70 in Litopenaeus vannamei[J].Journal of Fishery Sciences of China,2006,13(2):305-309.
Authors:WU Ren  XIE Shu-tao  SUN Yong  WANYAN Xiao-qing  ZHANG Qi-zhong
Institution:Institution of hydrobiology, Jinan University, Guangzhou 510632, China
Abstract:
Keywords:Litopenaeus vannmei  heat shock protein 70(HSP70)  prokaryotic expression
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