| 绿色巴夫藻cDNA文库的构建及EST序列分析 |
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| 引用本文： | 牛艳,孔文涛,杨婧,孔健.绿色巴夫藻cDNA文库的构建及EST序列分析[J].中国水产科学,2006,13(6):902-907. |
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| 作者姓名： | 牛艳 孔文涛 杨婧 孔健 |
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| 作者单位： | 山东大学,微生物技术国家重点实验室,山东,济南,250100 |
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| 摘 要： | 将绿色巴夫藻(Pavlova viridis)培养液逐种加入氨苄青霉素、硫酸庆大霉素、硫酸阿米卡星3种抗生素处理,经检验后无杂菌污染。以该藻种为实验材料,以λTriplEx2为载体,利用SMART技术构建其cDNA文库。经测定文库滴度为6×106pfu/mL,重组率为98%。利用PCR方法检测cDNA文库插入DNA片段的大小,其长度为0.5~2 kb,表明该文库达到建库要求,可用来筛选低丰度mRNA的基因克隆。对cDNA文库中的阳性克隆进行随机PCR扩增,挑选插入DNA片段较大的克隆,进行5’末端单向序列测定,测序结果与NCBI数据库进行BLAST比对,获得了200个有研究价值的EST序列和cDNA克隆,为进一步研究和开发绿色巴夫藻的功能基因奠定了基础。
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| 关 键 词： | 绿色巴夫藻 cDNA文库 SMART技术 序列表达标签 多不饱和脂肪酸 |
| 文章编号： | 1005-8737-（2006）06-0902-06 |
| 收稿时间： | 2005-11-22 |
| 修稿时间： | 2006-05-18 |
cDNA library construction and EST analysis of Pavlova viridis |
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| NIU Yan,KONG Wen-tao,YANG Jing,KONG Jian.cDNA library construction and EST analysis of Pavlova viridis[J].Journal of Fishery Sciences of China,2006,13(6):902-907. |
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| Authors: | NIU Yan KONG Wen-tao YANG Jing KONG Jian |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Pavlova viridis cDNA library SMART technique expressed sequence tags polyunsaturation fatty acid |
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