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圆斑星鲽促性腺激素释放激素基因克隆及表达特性
引用本文:柳学周,徐永江,廖梅杰,潘传燕,王妍妍.圆斑星鲽促性腺激素释放激素基因克隆及表达特性[J].中国水产科学,2013,20(1):12-24.
作者姓名:柳学周  徐永江  廖梅杰  潘传燕  王妍妍
作者单位:1. 中国水产科学研究院 黄海水产研究所, 青岛市海水鱼类种子工程与生物技术重点实验室, 山东 青岛 266071
2. 农业部海洋渔业可持续发展重点实验室 中国水产科学研究院 黄海水产研究所, 山东 青岛 266071
3. 中国海洋大学 水产学院, 山东 青岛 266003
基金项目:国家鲆鲽类产业技术体系项目(CARS-50);国家863计划项目(2012AA10A413);中央级公益性事业单位基本科研业务费项目(20603022012022);国家留学人员科技活动项目择优资助经费资助项目
摘    要:采用RACE技术,在圆斑星鲽(Verasper variegatus)脑中克隆到3种GnRH基因的cDNA序列: cGnRH-Ⅱ、sGnRH和sbGnRH.每种GnRH都包括1个信号肽、1个Gly-Lys-Arg连接序列和1个GnRH相关肽.其中, cGnRH-Ⅱ的cDNA全长为568 bp,编码85个氨基酸, ORF为255 bp,5′UTR为141 bp,3′UTR为169 bp.sGnRH的cDNA全长为457 bp,编码90个氨基酸, ORF为270 bp,5′UTR为41 bp,3′UTR为143 bp.sbGnRH的cDNA全长为381 bp,编码98个氨基酸, ORF为294 bp,5′UTR为48 bp,3′UTR为36 bp.分析了3种GnRH基因的编码氨基酸序列与其他脊椎动物的同源性,圆斑星鲽 GnRH 与鲽形目鱼类氨基酸同源性最高,其次为鲈形目鱼类.对3种 GnRH 基因的系统进化分析表明,圆斑星鲽 GnRH 基因与其他鲽形目鱼类亲缘关系最近,其次为鲈形目、鲑形目和鳗鲡目鱼类.荧光定量PCR分析表明,3种GnRH基因都在脑中表现出最高表达水平且具有性别特异性表达模式:雌性中不同组织的 GnRH mRNA 表达水平都相应高于雄性.组织表达分析表明, cGnRH-Ⅱ的 mRNA 仅在脑中表达,而sbGnRH在各个组织都有表达, sGnRH仅在脑、垂体和性腺中表达.脑中sbGnRH mRNA的表达水平在卵巢成熟过程中变化显著(P<0.05),而其他两种GnRH的mRNA表达水平变化不显著(P>0.05).本研究首次在圆斑星鲽脑中克隆到3种GnRH基因,其组织和季节表达水平变化表明sbGnRH可能是圆斑星鲽生殖调控的关键GnRH类型,本结果可为圆斑星鲽生殖调控机制和人工繁育技术研究提供理论支撑.

关 键 词:圆斑星鲽  GnRH  分子克隆  表达特性
修稿时间:2013/2/6 0:00:00

Cloning and expression characteristics of gonadotropin releasing hormone genes in spotted halibut Verasper variegatus
LIU Xuezhou,XU Yongjiang,LIAO Meijie,PAN Chuanyan,WANG Yanyan.Cloning and expression characteristics of gonadotropin releasing hormone genes in spotted halibut Verasper variegatus[J].Journal of Fishery Sciences of China,2013,20(1):12-24.
Authors:LIU Xuezhou  XU Yongjiang  LIAO Meijie  PAN Chuanyan  WANG Yanyan
Institution:1,2 1.Key Laboratory of Sustainable Development of Marine Fisheries,Ministry of Agriculture,Yellow Sea Fisheries Research Institute,Chinese Academy of Fisheries Sciences,Qingdao 266071,China; 2.Yellow Sea Fisheries Research Institute,Chinese Academy of Fishery Sciences,Qingdao Key Laboratory for Marine Fish Breeding and Biotechnology,Qingdao 266071,China; 3.College of fishery Sciences,Ocean University of China,Qingdao 266003,China
Abstract:
Keywords:Verasper variegates  GnRH  cloning  expression characteristics
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