1个白斑综合症病毒基因的克隆及其在大肠杆菌M15中的表达 |
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引用本文: | 江世贵,何建国,张欣强,邓敏,余建秀.1个白斑综合症病毒基因的克隆及其在大肠杆菌M15中的表达[J].中国水产科学,2003,10(1):10-13. |
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作者姓名: | 江世贵 何建国 张欣强 邓敏 余建秀 |
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作者单位: | 中山大学,生命科学学院,广东,广州,510275 |
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基金项目: | 资助项目:国家'八六三'高技术研究发展计划资助项目(2001AA621030),中国水产科学研究院重点项目(99-01-02). |
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摘 要: | 根据对虾白斑综合症病毒(white spot syndrome virus,WSSV)1个可能编码蛋白的开放读码框(open reading frame,ORF)的序列(WSSV A基因),结合pQE30载体的多克隆位点,设计1对引物进行PCR,扩增出大小为0.28kb的A基因片段。把目的片段克隆到pGEM-T Easy载体上,构建出重组质粒pGT-A,再用引物两端酶酶切出目的片段,并按正确的读码框顺序插入到pQE30表达载体上的乳糖操纵子中,构建出带有目的片段的重组质粒pQE30-A,然后将重组质粒转化到大肠杆菌M15细胞,经IPTG诱导,SDS-PAGE和Western blot显示有与A基因预期大小11kD相吻合的融合蛋白带。结果表明,来源于WSSV的这一ORF是1个可表达的基因。
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关 键 词: | 白斑综合症 大肠杆菌M15 基因克隆 白斑综合症病毒 融合蛋白 基因表达 对虾 |
文章编号: | 1005-8737(2003)01-010-04 |
修稿时间: | 2002年2月15日 |
Cloning of a gene from WSSV and expression in Escherichia coli M15 |
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Abstract: | |
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Keywords: | gene cloning and expression WSSV fusion protein Western blot |
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