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迟缓爱德华氏菌间接ELISA快速检测法
引用本文:白方方,兰建新,王燕,韩茵,张晓华.迟缓爱德华氏菌间接ELISA快速检测法[J].中国水产科学,2009,4(4).
作者姓名:白方方  兰建新  王燕  韩茵  张晓华
作者单位:中国海洋大学海洋生命学院,山东,青岛,266003
基金项目:国家863计划资助项目,农业部公益性行业科研专项资助 
摘    要:以迟缓爱德华氏菌(Edwardsiella tarda)WY28作为抗原,免疫新西兰兔,获得效价为1:2 048的多克隆抗体;以此多克隆抗体作为-抗,山羊抗兔IgG-HRP作为酶标二抗,建立迟缓爱德华氏菌的间接EIJSA快速检测法.采用棋盘滴定法确定抗原与一抗的最佳工作浓度分别为106 CFU·mL-1和1:10 000;酶标二抗的最适工作浓度为1:1 000.病原菌检测灵敏度为每孔103 CFU.该方法标准化后具有快速、灵敏等特性,与肠杆菌科其他细菌参考菌株无交叉反应,具良好的特异性.对养殖场发病大菱鲆(Scophthalmus maximus)和半滑舌鳎中分离的细菌菌株进行检测,从56株分离菌株中检测出27株迟缓爱德华氏菌,阳性检出率为48.2%.该方法的建立有助于快速准确地诊断由迟缓爱德华氏菌引起的养殖鱼类病害.

关 键 词:间接ELISA  迟缓爱德华氏菌  多克隆抗体  水产养殖  病原菌

Indirect enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) for rapid detection of Edwardsiella tarda
BAI Fang-fang,LAN Jian-xin,WANG Yan,HAN Yin,ZHANG Xiao-hua.Indirect enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) for rapid detection of Edwardsiella tarda[J].Journal of Fishery Sciences of China,2009,4(4).
Authors:BAI Fang-fang  LAN Jian-xin  WANG Yan  HAN Yin  ZHANG Xiao-hua
Abstract:
Keywords:
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