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锦鲤疱疹病春主要囊膜蛋白基因的PCR扩增与序列分析
引用本文:谭爱萍,邹为民,赵飞,姜兰,陈信廉,劳海华,简清,陆小萏,罗理.锦鲤疱疹病春主要囊膜蛋白基因的PCR扩增与序列分析[J].中国水产科学,2008,15(5).
作者姓名:谭爱萍  邹为民  赵飞  姜兰  陈信廉  劳海华  简清  陆小萏  罗理
基金项目:广东省重大科技兴渔项目,广东省重大科技兴渔项目,广东省重大科技兴渔项目
摘    要:为了进一步研究锦鲤疱疹病毒主要囊膜蛋白(KHV-MEP)的功能及锦鲤疱疹病毒(KHV)的感染机制,根据KHV-MEP基因序列设计并合成1对引物,从自然感染KHV发病的锦鲤(Cyprinus carpio Koi)肝组织总DNA中扩增获得特异性基因片段.将所得基因片段克隆到pMD18-T Simple Vector载体中,获得重组质粒T-KMEP;酶切鉴定后进行序列测定,并采用氨基酸亲水性分析软件Tmpred对其编码氨基酸序列进行分析;在对该片段所编码氨基酸可能抗原位点分析的基础上,进行PCR改造构建原核表达载体,获得重组表达载体pBV-KMEP1和pBV-KMEP2.所获得的基因片段大小为771 bp,该基因片段与GenBank中已登录的KHV-MEP基因(AB178537)的同源性为100%,是一个完整的开放阅读框,所编码的蛋白由256个氨基酸组成,分子量为28.2kD,等电点(PI)为8.65.该序列含有4个跨膜区,可构成主要抗原决定簇.结果显示所获得的目的基因片段就是锦鲤主要囊膜蛋白全基因.

关 键 词:锦鲤疱疹病毒  主要囊膜蛋白基因  序列分析  原核表达载体

PCR amplification and sequence analysis of the major envelop protein gene of KHV
TAN Ai-ping,ZOU Wei-min,ZHAO Fei,JIANG Lan,CHEN Xin-lian,LAO Hai-hua,JIAN Qing,LU Xiao-dan,LUO Li.PCR amplification and sequence analysis of the major envelop protein gene of KHV[J].Journal of Fishery Sciences of China,2008,15(5).
Authors:TAN Ai-ping  ZOU Wei-min  ZHAO Fei  JIANG Lan  CHEN Xin-lian  LAO Hai-hua  JIAN Qing  LU Xiao-dan  LUO Li
Abstract:
Keywords:
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