| 团头鲂 HSP70 cDNA 的克隆、序列分析以及热应激对其 mRNA 表达的影响 |
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| 引用本文： | 明建华,谢骏,刘波,何义进,周群兰,潘良坤,俞菊华,徐跑.团头鲂 HSP70 cDNA 的克隆、序列分析以及热应激对其 mRNA 表达的影响[J].中国水产科学,2009,5(5). |
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| 作者姓名： | 明建华 谢骏 刘波 何义进 周群兰 潘良坤 俞菊华 徐跑 |
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| 作者单位： | 1. 南京农业大学,无锡渔业学院,江苏,无锡,214081;中国水产科学研究院淡水渔业研究中心,农业部淡水鱼类遗传育种和养殖生物学重点开放实验室,江苏,无锡,214081
2. 中国水产科学研究院淡水渔业研究中心,农业部淡水鱼类遗传育种和养殖生物学重点开放实验室,江苏,无锡,214081 |
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| 基金项目： | 农业部行业专项，现代农业产业技术体系建设专项资金，International Foundation for Science.IFS |
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| 摘 要： | 采用RT-PCR和cDNA末端快速扩增法(RACE)分离、克隆出团头鲂(Megalobrama amblycephala)肝脏热休克蛋白70(HSP70)基因全长cDNA序列,共2 224 bp,包括135 bp5'非翻译区、1 932 bp阅读框以及157 bp 3'非翻泽区不包括Poly(A)].阅读框共编码643个氨基酸,分子量计算值为70.53 kD,理论等电点为5.25.该HSP70基因在翻译区不含内含子,符合诱导型HSP70的特征.团头鲂HSP70氨基酸序列中含有HSP70家族的3个签名序列以及细胞质特异性调控基序EEVD等.同源性分析表明,团头鲂HSP70氨基酸序列与斑马鱼等脊椎动物的相似性高达84.0%以上,与无脊椎动物果蝇的相似性也高达73.4%.生物信息学分析显示,团头鲂HSPTO基因所编码的蛋白质以亲水性区域为主,具有丰富的B细胞抗原位点,无信号肽,无跨膜区域,为非分泌型蛋白;同时还含有众多的蛋白激酶C磷酸化位点、N-肉豆蔻酰化位点、酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化位点和N-糖基化位点,推测其可能在细胞信号转导与调控中发挥重要作用.该蛋白含有2个部分重叠的双向核定位序列,二级结构以α-螺旋和无规卷曲为主,空间结构包括N端ATPase功能域和C端多肽结合功能域.应用实时定量PCR研究高温(34℃)应激对团头鲂HSP70 mRNA表达的影响.结果表明,在热应激过程巾肝脏HSP70 mRNA水平呈先升高后下降的变化趋势,说明该基因的表达受热应激调控,本实验克隆的序列为诱导型HSP70 cDNA.
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| 关 键 词： | 团头鲂 热应激 克隆 表达 实时定量PCR |
| 修稿时间： | 2009/10/19 0:00:00 |
Cloning, sequence analysis of HSP70 cDNA and effects of heat stress on its mRNA expression in Megalobrama amblycephala |
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| MING Jian-hua,XIE Jun,LIU Bo,HE Yi-jin,ZHOU Qun-lan,PAN Liang-kun,YU Ju-hua,XU Pao.Cloning, sequence analysis of HSP70 cDNA and effects of heat stress on its mRNA expression in Megalobrama amblycephala[J].Journal of Fishery Sciences of China,2009,5(5). |
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| Authors: | MING Jian-hua XIE Jun LIU Bo HE Yi-jin ZHOU Qun-lan PAN Liang-kun YU Ju-hua XU Pao |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | HSP70 |
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