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大黄鱼微卫星标记的富集与筛选
引用本文:郝君,孙效文,梁利群,鲁翠云.大黄鱼微卫星标记的富集与筛选[J].中国水产科学,2006,13(5):762-766.
作者姓名:郝君  孙效文  梁利群  鲁翠云
作者单位:1. 中国水产科学研究院,黑龙江水产研究所,农业部北方鱼类基因工程育种试验室,黑龙江,哈尔滨,150070;大连水产学院生命科学与技术学院,辽宁,大连,116023
2. 中国水产科学研究院,黑龙江水产研究所,农业部北方鱼类基因工程育种试验室,黑龙江,哈尔滨,150070
基金项目:国家重点基础研究发展计划(973计划)
摘    要:根据生物素与链霉亲和素的亲和原理,采用生物素-磁珠富集微卫星,与传统放射性同位素杂交法相结合,构建筛选大黄鱼的微卫星文库。用生物素-微卫星捕捉单链限制性酶切片段(含有接头和大黄鱼微卫星序列),经PCR扩增单链目的片段形成双链,然后连接至T载体上,转化感受态细胞。将移至硝酸纤维素膜的重组菌用^32P标记的放射性同位素探针50γ-^32P]ATP(CA)15筛选出阳性克隆菌。测序结果发现,阳性克隆率为71.9%,105个微卫星位点。其中选取设计合成30对并筛选出22对可用引物。说明所建大黄鱼微卫星文库是一个高质量的文库,可为大黄鱼基因组结构分析、大黄鱼精密微卫星连锁图谱构建、分子进化和系统发育研究、分子标记辅助育种以及经济性状的QTL定位提供大量的微卫星标记。

关 键 词:大黄鱼  微卫星  磁珠  生物素
文章编号:1005-8737-(2006)05-0762-05
收稿时间:2005-07-29
修稿时间:2005-11-14

Enrichment of large yellow croaker genome microsatellite markers using magnet beads
HAO Jun,SUN Xiao-wen,LIANG Li-qu,LU Cui-yun.Enrichment of large yellow croaker genome microsatellite markers using magnet beads[J].Journal of Fishery Sciences of China,2006,13(5):762-766.
Authors:HAO Jun  SUN Xiao-wen  LIANG Li-qu  LU Cui-yun
Institution:1. Key Laboratory of Bioengineering Breeding of Northern Finfish, Ministry of Agriculture, Heilongjiang River Fisheries Research Institute, Chinese Academy of Fisheries Sciences, Harbin 150070, China; 2. College of Aquac-life .Science and Technology, Dalian Fisheries University, Dalian 116023, China
Abstract:
Keywords:large yellow croaker  microsatellite  magnetic beads  biotin
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