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大口黑鲈肝细胞中恩诺沙星的消除及其代谢酶活性的测定
引用本文:王翔凌,杨先乐,林茂,喻文娟,张宁,张书俊.大口黑鲈肝细胞中恩诺沙星的消除及其代谢酶活性的测定[J].中国水产科学,2007,14(6):1004-1009.
作者姓名:王翔凌  杨先乐  林茂  喻文娟  张宁  张书俊
作者单位:1. 上海水产大学农业部渔业动植物病原库,上海,200090;上海高校水产养殖学E-研究院,上海,200090
2. 集美大学水产学院,福建,厦门,361021
3. 上海水产大学农业部渔业动植物病原库,上海,200090
4. 上海水产大学  农业部渔业动植物病原库,上海,200090
基金项目:国家自然科学基金;海市教委E-研究院建设资助;上海市重点学科建设项目
摘    要:建立了反相高效液相色谱法检测大口黑鲈(Micropterus salmoides)原代肝细胞中恩诺沙星(Enrofloxacin,EF)代谢情况的方法,并通过其代谢产物环丙沙星(Ciprofloxacin,CF)来间接反映恩诺沙星N-脱乙基酶的活性。采用二氯甲烷提取细胞中的药物,正己烷去脂,反相高效液相色谱法测定其中的药物浓度。经测得该方法样品回收率均大于80.28%,日间变异系数小于5.54%。通过EF与大口黑鲈肝细胞进行孵育,发现EF在细胞中的消除方程为C=50e-0.0008t,消除半衰期(T1/2)为86.63 h,消除速率常数(K)为8×10-4/h。对孵育过程中的酶活研究发现最佳孵育时间为45 min,其酶活性为0.25μg/(min.mg),酶动力学参数中最大反应速率(Vmax)为0.29μg/(min.mg),米氏常数(Km)为22.37μg/mL,内在清除率(Clint)为0.01 mL/(min.mg)。结果表明,该酶与底物结合力不强,酶促反应强度较弱,EF在大口黑鲈肝细胞中的代谢较缓慢。

关 键 词:大口黑鲈  肝细胞  恩诺沙星  反相高效液相色谱法  消除  酶活
文章编号:1005-8737-(2007)06-1004-06
修稿时间:2007年4月21日

Elimination of enrofloxacin and detection of metabolic enzyme activity in Micropterus salmoides hepatocytes
WANG Xiang-ling,YANG Xian-le,LIN Mao,YU Wen-juan,ZHANG Ning,ZHANG Shu-jun.Elimination of enrofloxacin and detection of metabolic enzyme activity in Micropterus salmoides hepatocytes[J].Journal of Fishery Sciences of China,2007,14(6):1004-1009.
Authors:WANG Xiang-ling  YANG Xian-le  LIN Mao  YU Wen-juan  ZHANG Ning  ZHANG Shu-jun
Abstract:
Keywords:Micropterus salmoides  hepatocytes  enrofloxacin  RP-HPLC  elimination  enzyme activity
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