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贝类派琴虫实时荧光定量PCR检测方法的建立和应用
引用本文:吴绍强,李海艳,林祥梅,郑腾,李西锋,刘建,梅琳,韩雪清,贾广乐.贝类派琴虫实时荧光定量PCR检测方法的建立和应用[J].海洋水产研究,2009,30(5):58-63.
作者姓名:吴绍强  李海艳  林祥梅  郑腾  李西锋  刘建  梅琳  韩雪清  贾广乐
作者单位:1. 中国检验检疫科学研究院,北京,100029
2. 中国检验检疫科学研究院,北京,100029;内蒙古农业大学,呼和浩特,010018
3. 福建出入境检验检疫局,福州,350003
4. 黄岛出入境检验检疫局,青岛,266555
基金项目:国家科技支撑计划,国家质检总局科研基金 
摘    要:选择派琴虫保守的核糖体DNAITS-2区域设计引物和TaqMan探针,通过对反应体系和反应条件进行优化,建立了实时荧光定量PCR检测派琴虫的方法。所构建方法检测质粒模板DNA的动态范围为2.6×10^1~2.6×10^7拷贝,敏感度可检测到26拷贝质粒DNA,而且与包拉米原虫、隐孢子虫等其他寄生性原虫无交叉反应,也不受贝类组织DNA的干扰。利用本研究所建立的方法对来自我国山东、福建等不同沿海海域的30份贝类样品进行检测,检出阳性样品3份。研究表明,本研究所构建的派琴虫实时荧光定量PCR检测方法具有快速、灵敏和特异等优点,可满足国内养殖场及进出口水生动物携带派琴虫的检测需要。

关 键 词:派琴虫  贝类  实时荧光PCR  检测
收稿时间:2008/9/2 0:00:00
修稿时间:2008/11/28 0:00:00

Establishment and application of real time PCR method for detection of Perkinsus sp. in bivalves
Institution:WU Shao-qiang, LI Hai-yan, LIN Xiang-mei, ZHENG Teng, LI Xi-feng, LIU Jian, MEI Lin, HAN Xue-qing, JIA Guang-le(1 Chinese Academy of Inspection and Quarantine, Beijing 100029;2Inner Mongolia Agricultural University, Huhehaote, 010018;3 Fujian Entry-exit Inspection and Quarantine, Fuzhou 350003;4 Huangdao Entry exit Inspection and Quarantine, Qingdao 266555)
Abstract:
Keywords:Perkinsus sp  Bivalve Real time PCR Detection
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