| 松江鲈白介素15(TfIL-15)的结构特征与重组表达 |
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| 引用本文： | 刘莹莹,于珊珊,柴迎梅,林啸鹏,祝茜.松江鲈白介素15(TfIL-15)的结构特征与重组表达[J].海洋水产研究,2019,40(4):95-103. |
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| 作者姓名： | 刘莹莹 于珊珊 柴迎梅 林啸鹏 祝茜 |
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| 作者单位： | 山东大学(威海)海洋学院 威海 264209;山东大学(威海)海洋学院 威海 264209;山东大学(威海)海洋学院 威海 264209;山东大学(威海)海洋学院 威海 264209;山东大学(威海)海洋学院 威海 264209 |
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| 基金项目： | 山东省自然科学基金(ZR2016CP10)和威海市科技局项目(1070413421706)共同资助 |
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| 摘 要： | 为研究白介素15(Interleukin-15, IL-15)在松江鲈(Trachidermus fasciatus Heckel)先天免疫中的功能，本研究利用RACE技术克隆得到松江鲈IL-15基因(命名为TfIL-15)的全长cDNA序列，其长度为1140 bp，包括5¢-非编码区(5¢-UTR) 165 bp、开放阅读框(ORF) 522 bp和3¢UTR 453 bp。在5¢UTR区域，存在4个读码框外的AUG翻译起始位点。基因ORF编码173个氨基酸(aa)，其中，前59 aa为信号肽序列。成熟肽全长为114 aa，预测分子量为12.975 kDa，理论等电点为5.15。同源比对发现，鱼类IL-15变异程度较高，TfIL-15与其他鱼类IL-15同源性在23%~61%之间。多序列比对和三维结构构建结果显示，TfIL-15具有典型4个α螺旋二级结构，形成二硫键的4个半胱氨酸高度保守。qRT-PCR分析表明，TfIL-15广泛表达于松江鲈各组织中。腹腔注射脂多糖(Lipopolysaccharides, LPS)后，TfIL-15 mRNA在血液、皮肤、肝脏和脾脏中均上调表达。在皮肤和血液中，刺激后2 h表达量迅速上调至最高峰，分别为对照组的74倍和41倍。脾脏和肝脏在刺激后12 h分别达到对照组的3倍和18倍。肝脏中，刺激后96 h，表达量再次上调至对照组的86倍。上述结果表明，TfIL-15可能参与了松江鲈抵抗外界刺激的先天免疫过程。另外，通过构建TfIL-15成熟肽的原核表达载体，成功获得重组蛋白，为进一步研究TfIL-15蛋白的功能奠定了基础。
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| 关 键 词： | 松江鲈 白介素15(IL-15) 克隆 基因表达 重组蛋白表达 |
| 收稿时间： | 2018/6/25 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2018/7/31 0:00:00 |
Characterization and Recombinant Protein Expression of Interleukin-15 from Roughskin Sculpin, Trachidermus fasciatus |
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| LIU Yingying,YU Shanshan,CHAI Yingmei,LIN Xiaopeng and ZHU Qian.Characterization and Recombinant Protein Expression of Interleukin-15 from Roughskin Sculpin, Trachidermus fasciatus[J].Marine Fisheries Research,2019,40(4):95-103. |
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| Authors: | LIU Yingying YU Shanshan CHAI Yingmei LIN Xiaopeng and ZHU Qian |
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| Institution: | School of Marine Science, Shandong University (Weihai), Weihai 264209,School of Marine Science, Shandong University (Weihai), Weihai 264209,School of Marine Science, Shandong University (Weihai), Weihai 264209,School of Marine Science, Shandong University (Weihai), Weihai 264209 and School of Marine Science, Shandong University (Weihai), Weihai 264209 |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Roughskin sculpin (Trachidermus fasciatus) Interleukin-15 (IL-15) Gene clone Relative expression Recombinant protein expression |
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